考 试 试 卷 册
（2006-2007学年第I学期）
考试科目 生物化学 出卷教师 周丛照，李卫芳 使用班级 0620700 考试日期 2007年元月23日
中国科学技术大学教务处
中 国 科 学 技 术 大 学 2006-2007学年第I学期考试试卷
考试科目: 生物化学 得分:__________ 学生所在系:___________ 姓名:__________ 学号:___________
一、 填空题 （每空2分， 共60分）
1.一DNA样品中腺嘌呤为21％，该DNA样品中各碱基组分比例为： A＝T＝21％，C＝G＝29％ 。
2. 什么是酶的自杀性底物（suicide substrate）？ suicide substrate: is an affinity label that is unreactive until it is acted upon by the enzyme, at which point it binds irreversibly
3.酶的专一性常数（specificity constant）是： Kcat/Km
4.hormone receptor 至少有2个位点: 一与激素结合,另一为受体发挥功能位点. 5. 脂质在血液中的运输，FA与血浆中的血清清蛋白结合；磷脂、三酰甘油酯、胆固醇等以脂蛋白颗粒形式。
6. 维生素B2又名核黄素，它的主要功能是在生物氧化中起传递H＋作用。 7. 丝氨酸蛋白酶的活性部位位于酶分子表面凹陷的小口袋中，可用于鉴定酶对底物残基的专一性，如胰蛋白酶（tripsin）断裂Arg，Lys 等的羧基端肽键。 8．一酶促反应中，Kcat 为30.0 s-1, km 为0.0050 M, 当底物浓度为0.00167M，其速率达最大反应速率的四分之一。
9. 典型的坏血病是由于哪一种物质的缺乏引起的？维生素C
10.生物膜的相变温度（ transition temperature）指的是The temperature at which a membrane converts from liquid crystal to gel-like structures ，影响生物膜相变温度的因素有：the membrane lipid composition, especially in fatty acid composition（the length and the degree of unsaturation） and the membrane temperature.
11 三酰甘油酯（Triacylglycerols）和多糖（polysaccharides）作为贮存能源物质（stored fuels），各有什么优势？Triacylglycerol has more reduced so that it yields more energy, and Triacylglycerol is hydrophobic, so that it do not have to carry the extra weight of water of hydration While carbohydrates is ready solubility in water, so that it is the quick sources of metabolic energy
12.请将磷脂酰丝氨酸（phosphatidylserine）, 磷脂酰乙醇胺（phosphatidylethanolamine）, 卵磷脂（phosphatidylcholine），三酰基甘油
（triacylglycerol）这些脂类物质依照疏水性由大到小的顺序排列：triacylglycerol, phosphatidylcholine & phosphatidylethanolamine，phosphatidylserine
13. 酶蛋白氨基酸侧链提供各种亲核中心，可以对底物进行共价催化，酶蛋白上最常见的3种亲核基团为：The hydroxide group of serineThe sulfhydryl group of cysteineThe imidazole group of histidine，底物的亲电中心主要有：磷酰基、酰基、糖基。
14． 过渡态类似物在酶学研究中的意义：Provide insight into catalytic mechanism；Serve as potent and specific inhibitors of enzymes；Be used as immunogens to generate a wide range of novel catalysis
15．结构基因组学（Structural Genomics）定义为：It is an approach aiming at solving 3-D structures of the proteins encoded by an entire genome. 16．蛋白质分子量的测定方法有SDS PAGE，HPLC ，MS 等（至少写出2种）。 17. 芳香族氨基酸(aromatic amino acids)有：Phe(F), Tyr(Y), Trp(W) （至少写出2种），碱性氨基酸（basic amino acids）有 Arg（R）, Lys(K) His(H)（至少写出2种）。 18.氨基酸常见的翻译后修饰作用（Post-translational modifications）有：Phosphorylation (磷酸化),Glucosylation (糖基化),Glutathionylation (谷胱甘肽化),Amidation (氨基化),Methylation (甲基化),Acetylation (乙基化),Dimethylation (二甲基化) （至少写出3种）
19. 纤维状蛋白（fibrous protein）中含量最多的三种氨基酸为：Ala, Gly,Ser。 20．维持蛋白质三维结构的作用力有： hydrogen bond，van de waals force，, hydrophobic interaction，salt bridge，disulfate bond（至少写出4种） 21．何谓蛋白质的复性（renaturation）？Certain globular proteins denatured by heat, extremes of pH, or denaturing reagents will regain their native structure and their biological activity if returned to conditions in which the native conformation is stable. This process is called renaturation. 22．分子伴侣（Molecular chaperones）指的是proteins that interact with partially folded or improperly folded polypeptides, facilitating correct folding pathways or providing microenvironments in which folding can occur 23.等电点（isoelectric point or Isoelectric focusing) 指的是：a distinct pH at which the net average charge of all the groups adds up to zero 24蛋白质测序有哪些方法？1)Edman P. 1950: PITC (Edeman) degradation, N-terminal sequencing 2) Sanger et al. 1953, complete sequence of bovine insulin (21+30 res.)3) amino acid sequence deduced from the open reading frame (ORF)1) partial or complete proteolysis of the target protein
2) determine the mass of all fragments (MS/MS)3) calculate the possible sequences based on the results from 2)4) reconstruction the contig by
overlaps（至少写出2种）
二、选择题 （每题1分， 共4分）
1．测定酶活性时，通常以底物浓度变化小于多少时测得的速度为反应的初速度？ (e)
（a） 0.1% (b) 0.5% (c) 1% (d) 2% (e) 5%
2. 对于具有正协同效应的别构酶， v 达到Vmax 的10％ 时的[S]与v 达到Vmax 的90％ 时的[S]之比可能为（d ）
(a) 1:500 (b) 1:100 (c) 1:81 (d) 1:3 (e ) 1:1 3. 大肠杆菌天冬氨酸转氨甲酰酶（ATCase）别构抑制剂是：(b) （a）ATP（b）CTP（a）UTP（a）ADP (e) GTP 4．下列哪一种水溶性维生素被氨甲蝶呤所拮抗？(d)
（a）维生素B12 （b）核黄素（c）维生素C （d）叶酸 （e）维生素B6
三、判断题 （每题1分， 共6分）
1. 酶及其底物之间紧密的结合意味着能够发生快速催化作用。（F） 2．特异的突变作用导致的活性消失表明突变残基具有催化活性。 3. 同一分子的DNA三种不同形式在琼脂糖电泳胶中泳动的速率为：
超螺旋DNA﹥线性 DNA﹥开环DNA（T ）
4. 酶的pH值－酶活性曲线均为钟罩型。 （F）
5. 来源于同一个体的脑细胞和肌细胞的DNA的Tm值不同。（F）
6. 凝集素（lectin）是多糖类物质，能够特异性地结合不同的糖类物质，介导多种生物反应。（F）
五、问答题 （共30分）
1． 下列哪一个序列不能被限制性内切核酸酶切断？为什么？（a）GAATTC; (b)GTATAC, (c)GTAATC, (d)CAATTG (6)
Key: ? sequence is difficult to be cut. For it hasn’t palindrome structure.
2．简述双脱氧终止法（dideoxy chain termination method）测定DNA序列的基本原理。下图是测定DNA序列时的核酸电泳图，写出测定序列的DNA顺序。（6分）
电泳方向A C G T
Key: Add DNA polymerase, all 4 dNTPs, divide reaction mixture into 4 tubes, each of which contain a different ddNTP. ddNTPs with fluorescent dyes are used. The growing chains are terminated by the ddNTPs in each tube. Polyacrylamide gel electrophoresis separates chains according to size. The gel is dried and exposed to X-ray film or Detecteted using laser beam A detector records the fluorescence. The sequence is fed into a computer. The DNA sequence is： 5?-TCAACGGATGG-3?
3. 从酶反应动力学角度分析别构酶（Allosteric enzyme）与米氏酶（Michaelis enzyme）的不同。（6分）
Cooperativity index(CI)，Saturation ration (Rs) 典型的米氏类型的酶－－ｎ＝１， Ｒｓ＝８１ 正协同效应的别构酶－－ｎ>１， Ｒｓ<８１ 负协同效应的别构酶－－ｎ<１， Ｒｓ>８１ V0 versus 〔Ｓ〕
Michaelis enzyme无协同－－hyperbolic curve双曲线 Allosteric enzyme
positive modulator (+) －－ sigmoid saturation curveＳ形曲线 negative modulator (-)――negative hyperbolic curve
4. 简述胰腺分泌的胰岛素（insulin）和胰高血糖素（glucagon）是如何调控机体内的血糖（blood glucose）浓度的？ （6分）
5．请分析下列情况下，肌红蛋白（myoglobin）和血红蛋白（hemoglobin）与O2的亲和力是如何改变的？（6分）
a) 血浆（Blood plasma）的pH从7.4改变至7.2。 b) 肺部CO2的分压从6kPa 降至2kPa（normal）。
c) BPG从5mM（normal altitudes正常浓度）到8mM（高浓度） Effect on myoglobin’s affinities for O2: a)none,b)none,c)none;
Effect on hemoglobine’s affinities for O2: a)decreases, b)increaseas, c)decreases;
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