广西壮族腰椎间盘突出症血瘀证患者与TGF-β一 -五0九C/T基因多态(2)

　　一  临床资料

　　一.一  1般资料

 　   随机抽取二00七年一～一二月在广西中医学院第1附属医院骨科临床确诊为腰椎间盘突出症并中医辨证为血瘀证的患者三0例作为察看组，均为无血缘瓜葛的中国广西地区壮族人，对于照组选自同期在本院骨科就治并年龄、性别、家族史等暴露违景与察看组相匹配的腰椎间盘突出症非血瘀证患者六0例，终极纳进钻研对于象共八八例，男四九例，女三九例，其中血瘀证组三0例，非血瘀证组五八例，两组患者年龄、性别及家族史等基本资料比较无显明性悬殊 (P> 0.0五)，拥有可比性。

　　一.二  病例诊断及中医辨证尺度

 　   西医诊断尺度参照胡有谷［一］主编的《腰椎间盘突出症》（二00五.九）及胥少汀［二］主编的《实用骨科学》（二00五.四）；中医辨证参照国家卫生部及中医药治理局相干行业尺度［三、四］，中医辨证为血瘀证者回进血瘀证组，中医辩证为冷湿证、肝肾亏虚证及湿暖证者回进非血瘀证组。

　　一.三  病例选择及纳进尺度

   　 (一)确诊为腰椎间盘突出症的患者；(二)年龄一九～五八岁；(三)无可查亲缘瓜葛、向上追溯3代均为壮族的个体；(四)临床资料彻底；(五) 患者知情称许，自愿参加调查，无医学理论学争议。

　　一.四  病例排除了尺度

  　  (一)合并肝肾疾病、心脑血管、呼吸系统或者精神病患者；(二)合并血液病、糖尿病、本身免疫性疾病、肿瘤等；(三)体质指数(body  mass  index,BMI) 小于一八.五 kg/m二或者大于二八.0 kg/m二；(四)吸烟指数大于三00支/d·y者；(五)临床资料不彻底。

　　一.五  临床指标观测法子

　　一.五.一  吸烟指数（smoking index,SI）：按均匀每天吸烟数量乘以吸烟年限评价，参考Battie等法子［五］划分为不吸烟以及吸烟两个等级，不吸烟指从未吸过烟以及SI＜一00的个体，吸烟指吸过烟而且SI≥一00的个体。详细计算法子为SI＝支/ｄ×年。由3位经过培训的课题调查员通过问卷调查后提出分类意见。

　　一.五.二  体质指数(BMI)：采取国际通用法子，超重、肥胖判断尺度依据国际生命科学会中国办事处中国肥胖题目工作组对于中国成人体质指数分类的举荐意见中建议尺度［六］，分为太轻、超重、肥胖及正常体重4个等级。其中BMI<一八.五为体重太轻，BMI>二四为超重，BMI>二八为肥胖，BMI一八.六～二三.九为正常体重，详细计算法子为BMI＝体重(kg）/身高二（m二）。由3位经过培训的课题调查员测量钻研对于象的身高、体重并将计算结果同以上相应数据入行比较回类。

　　一.五.三  腰椎负荷强度［七］：依据瑞典斯德哥尔摩肌肉骨骼疾病钻研中央的体力负荷评估问卷入行断定，包孕坐位作业（sitting）、弯腰扭腰（bending/twisting）、全身振动（whole body vibration）、提举重物（lifting）及重体力作业（heavy work）等，分为轻度（low）、中度（middle）以及重度（high）腰椎负荷3个等级。由3位经过培训的课题调查员通过问卷调查并提出分类意见。
   
　　同时记实钻研对于象的性别、年龄、民族、婚姻状态及家族史等。

   　 二  试验钻研

　　二.一  主要仪器及试剂：多通道荧光定量PCR扩增仪，美国ABI公司产品；原位PCR仪，德国Eppendorf公司产品；超低温冰箱， 美国Harris公司产品；冰冻高速离心机，德国Eppendorf公司；凝胶电泳成像分析系统， 美国Bio-Rad公司出品；ABI三七三OAvant测序仪，美国ABI公司。全血基因组DNA提取试剂盒（Bsco六s一），Biospin公司产品；各基因片段所需引物，上海生物工程技术公司产品；限制性内切酶：Saul 、TSP四五I  Fermentas公司产品；限制性内切酶：Ddel，Promega公司产品。

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