31． CTAB法是一种从高等真核生物细胞中制备基因组DNA（总DNA）的技术。CTAB能跟核酸形成复合物，在高盐溶液(＞0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且稳定存在，当降低溶液中盐的浓度(＜0.3mol/L的 NaCl溶液)，CTAB——核酸的复合物就会因溶解度降低而沉淀，再用70% 酒精浸泡可洗脱掉CTAB；氯仿能使蛋白质发生变性而沉淀。提取和检测水稻基因组DNA的操作步骤如下： ① 在50ml离心管中加入20mlCTAB抽提缓冲液（主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB），于65℃水浴中预热；
② 将20 g新鲜的水稻幼嫩叶片剪成小段后放于研钵中，用液氮速冻并研磨成粉末，加入上述离心管中，于65℃水浴中保温30min；
③ 取出离心管中，冷却至室温，加入20ml的氯仿，轻轻混匀20min； ④ 在室温下以 12000r/min的转速离心10-20 min；
⑤ 将上清液移入另一个离心管中，加入2/3体积的经冷却的异丙醇，用玻璃棒轻轻搅动，小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的复合物沉淀；
⑥ 将沉淀移入另一个离心管中，加入70%乙醇洗涤，重复洗涤1-2次；
⑦ 吹干乙醇后，将DNA溶于适量的TE缓冲液中，在0.8%的琼脂糖凝胶上电泳分离并在核酸紫外检测仪上观察。 请回答下列问题：
（1）植物基因组DNA（总DNA）的提取通常采用机械研磨的方法，常温下研磨时，植物细胞匀浆含
有多种酶类对DNA的提取产生不利的影响。用液氮速冻研磨，材料易于破碎，同时还具有 的作用。
（2）实验步骤③ 、④的目的是 。
（3）实验步骤⑤中，玻璃棒上出现沉淀的主要原因是 。 （4）对DNA进行定性检测常用的试剂是 。DNA在260nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰，利用核酸紫外检测仪可以进行 。 31．（1）降低细胞匀浆中酶的活性，避免对DNA的提取产生不利影响 （2）去除溶液中的蛋白质
（3）溶液中NaCl的浓度＜0.3mol/L，CTAB - 核酸的复合物因溶解度降低而沉淀 （4）二苯胺 DNA含量的测定（或检测DNA）
参考答案：
1.D 2.D 3.C 4.B 5.C 6.D 7.B 8.A 9.A 10.A 11.B 12.D 13.D 14.D 15.D 16.C 17.B 18.C 19.D 20.A 21.AB 22.ABD 23.BD 24.BD 25.ACD
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