分子生物学问答题1

1?参与复制所需要的酶和蛋白因子有哪些。

原核生物 真核生物 引物酶 DnaG DNA聚合酶α DNA解螺旋酶 DnaB Mem2-7 SSB SSB RPA 拓扑异构酶 拓扑异构酶II 拓扑异构酶I、II 2?反转录的3种酶活性。 (1) RNA指导的DNA聚合酶活性； (2) DNA指导的DNA聚合酶活性； (3)

RNase H的活性是指它能够从5??3?和3??5?两个方向水解DNA-RNA杂合分子中的RNA。

?转录与复制的区别。

(1)转录只合成与模板互补的单链（不对称转录）。 (2)转录得到的链是由NTP组成的，而不是dNTP。 (3)RNA聚合酶不需要引物，可以从头起始转录。

(4)RNA产物不与模板保持互补状态。相反，RNA聚合酶在NTP添加处的几个核苷酸之后，便将正在延长的链从模板上置换下来。这一置换对于同步进行的翻译至关重要，同时也使得一个基因可以同时转录成多条RNA。 (5)转录的精确度（10-4）不如复制（10-7），因为它缺乏广泛的校正机制。

?简述转录延长特点。

① 核心酶负责RNA链延长反应；

② RNA链从5?-端向3? -端延长，新的核苷酸都是加到3?-OH上； ③ 对DNA模板链的阅读方向是3?-端向5?-端，合成的RNA链与之呈反向互补，即酶是沿着模板链的3?向5?方向或沿着编码链的5?向3?方向前进的；

④ 合成区域存在着动态变化的8 bp 的RNA-DNA杂合双链；

⑤ 模板DNA的双螺旋结构随着核心酶的移动发生解链和再复合的动态变化。

?简述细菌的转录终止机制

称为终止子（terminator）的序列引发RNA聚合酶从DNA上脱离并释放已合成的RNA链。细菌有两种类型的终止子。 Rho非依赖型终止子或称固有终止子，通过其转录产物形成的发夹结构而终止转录。

Rho依赖型终止子需要一个称为Rho的蛋白质来诱发终止反应。

?逆转录酶和逆转录过程；

逆转录酶：能催化以RNA模板合成双链DNA的酶，全称依赖RNA的DNA聚合酶； 逆转录过程：分三步：首先是逆转录酶以病毒基因组RNA为模板，催化dＮTP聚合生成DNA互补链，产物是RNA/DNA杂化双链；然后，杂化双链中的RNA被逆转录酶中有RNase活性的组分水解，被感染细胞内的Rnase Ｈ（Ｈ＝Ｈybrid）也可水解RNA链。RNA分解后剩下的单链DNA再用做模板，由逆转录酶催化合成第二条DNA互补链。

?原核生物的转录过程；

一、转录起始需要RNA聚合酶全酶;1. RNA聚合酶全酶(?2????)与模板结合，形成闭合转录复合体；2. DNA双链局部解开，形成开放转录复合体；3. 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应，形成转录起始复合物：

二、 RNA pol核心酶独立延长RNA链;1. ?亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移；2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。

三、原核生物转录延长与蛋白质的翻译同时进行;

四、原核生物转录终止分为依赖ρ(Rho)因子与非依赖ρ因子两大类;转录终止指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。

?真核生物的转录终止；

真核生物的转录终止和加尾修饰同时进行. 真核生物转录终止，和转录后修饰密切相关。转录不是在poly A的位置上终止，而是超出数百个乃至上千个核苷酸后才停顿。在读码框架的下游，常有一组共同序列AATAAA，再下游还有相当多的GT序列。这些序列称为转录终止的修饰点。

?试述转录因子的分类及其作用特点。

一、通用转录因子，是RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子，决定三种RNA(mRNA、tRNA及rRNA)转录的类别。

二、特异转录因子，为个别基因转录所必需，决定该基因的时间、空间特异性表达。

?细胞内信号转导分子种类。

（1）第二信使：在细胞内传递信息的小分子物质，如：Ca2+、DAG、IP3、Cer、cAMP、

cGMP、花生四烯酸及其代谢产物等。环核苷酸是重要的细胞内第二信使。

特点：①分子的浓度或分布在细胞外信号作用下发生迅速改变； ②类似物可模拟细胞外信号的作用；

③阻断该分子的变化可阻断细胞对外源信号的反应。 ④作为别位效应剂在细胞内有特定的靶蛋白分子。 （2）许多酶可通过其催化的反应而传递信号，作为信号转导分子的酶主要有两大类。 ①催化小分子信使生成和转化的酶，如腺苷酸环化酶、鸟苷酸环化酶、磷脂酶C、

磷脂酶D（PLD）等

②蛋白激酶，作为信号转导分子的蛋白激酶主要是蛋白酪氨酸激酶和蛋白丝/苏氨酸

激酶。

?Ca2+一、Ca2+在信息传递中如何发挥作用?

能与胞浆内的PKC结合聚集至质膜，在DAG和膜磷脂共同诱导下，PKC被激活。 二、可激活钙离子／钙调蛋白依赖的蛋白激酶(Ca2

／ CaM-PK)。 三、可与细胞内其它钙结合蛋白结合，直接导致其构象改变，而表达其信息效应。

?试述cAMP信息传递途径。

cAMP－PKA 途径-活化：①信号分子与受体结合，引起受体构象变化②受体活化G蛋白（结合GTP，α与βγ解离）③活化后的G蛋白激活腺苷酸环化酶（AC）④AC催化ATP生成cAMP⑤cAMP活化PKA（依赖cAMP的蛋白激酶）⑥PKA使目标蛋白磷酸化，调节代谢酶的活性或调节基因的表达

cAMP－PKA途径-失活：信息分子与受体解离，受体失活→G蛋白失活（GTP被水解成 GDP，αβγ亚基重新聚合）→AC失活→cAMP被磷酸二酯酶水解→PKA失活。

?IP3、DG在信号转导中的作用；

由PIP2水解产生的IP3是水溶性的小分子物质，离开细胞膜后能在细胞质内很快地扩散， IP3与内质网膜上的特异Ca2+-通道结合后，就能使内质网腔里的Ca2+释放到细胞质，而且释放的Ca2+具有正反馈效应，即释出的Ca2+结合到Ca2+通道，再促进Ca2+释放。

DG的重要作用是激活蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)，PKC是一类Ca2+依赖的蛋白激酶，能使选择性的靶蛋白的丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化。因IP3作用升高的细胞质内Ca2+能使PKC从细胞质转移到细胞膜胞质面。在Ca2+，DG和细胞膜磷脂成分中的磷脂酰丝氨酸的共同作用下激活PKC。哺乳动物中脑细胞的PKC浓度最高，其作用是使神经细胞的离子通道蛋白磷酸化，从而改变神经细胞膜的兴奋性。在许多细胞中，PKC能通过激活磷酸化级联反应，最后使一些转录因子磷酸化并激活，从而调控相关基因的表达。

?酵母双杂交原理

酵母双杂交系统的建立得力于对真核细胞调控转录起始过程的认识。研究发现，许多真核生物的转录激活因子都是由两个可以分开的、功能上相互独立的结构域组成的。例如，酵母的转录激活因子GAL4，在N端有一个由147个氨基酸组成的DNA结合域(BD)，C端有一个由113个氨基酸组成的转录激活域(AD)。GAL4分子的DNA结合域可以和上游激活序列(UAS)结合，而转录激活域则能激活UAS下游的基因进行转录。但是，单独的DNA结合域不能激活基因转录，单独的转录激活域也不能激活UAS的下游基因，它们之间只有通过某种方式结合在一起才具有完整的转录激活因子的功能。

?翻译机器的组成及其作用。

翻译机器由4种基本成分组成：mRNA、tRNA、氨基酰-tRNA合成酶和核糖体。 在遗传信息传递中，翻译远比DNA到RNA的转录复杂，因为mRNA不可能直接作为模板指导多肽链的合成。

(1)mRNA的蛋白编码区由称为密码子的三核苷酸单位组成，密码子决定氨基酸的顺序。 (2)tRNA介导氨基酸与密码子的相互作用。

(3)氨基酰-tRNA合成酶使氨基酸与tRNA结合起来。

(4)核糖体协调mRNA与tRNA的识别，并催化肽键的合成。

?叙述使翻译生成的新生多肽链成为有功能的蛋白质所需要经过的加工步骤。

加工步骤包括：化学修饰、折叠、亚基聚合等，其中最重要的是折叠。蛋白质合成后经靶向运输到达细胞的特异空间。

（1） 氨基酸残基的化学修饰：个别氨基酸可进行甲基化和乙酰化修饰；蛋白质糖

基化是一种复杂的化学修饰； 某些蛋白质加入异戊二烯基团；结合蛋白质加入辅基；

大多数蛋白质有二硫键的形成。 （2）肽链的折叠是按等级进行的：

① 在数毫秒内二级结构即沿多肽链形成。蛋白形成紧密但未折叠的结构，将其疏水基团置于内部，与水隔离；

② 其后的数秒或数分钟内，二级结构相互作用，通常经过一系列中间体构象，三级结构逐渐成形。

③ 多肽链通过非极性残基间疏水作用的介导，自动折叠成一个称之为“熔球”的紧密结构。

?遗传密码的特点；

1.方向性:翻译时遗传密码的阅读方向是5?→3?，即读码从mRNA的起始密码子AUG开始，按5?→3?的方向逐一阅读，直至终止密码子。

2.连续性:编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读，密码子及密码子的各碱基之间既无间隔也无交叉。

3.简并性:一种氨基酸可具有2个或2个以上的密码子为其编码。这一特性称为遗传密码的简并性。

4.摆动性:反密码子与密码子之间的配对有时并不严格遵守常见的碱基配对规律，这种现象称为摆动配对;

5.通用性:从简单的病毒到高等的人类，几乎使用同一套遗传密码，因此，遗传密码表中的这套“通用密码”基本上适用于生物界的所有物种，具有通用性。

?试述（乳糖）操纵子的组成和功能。

大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵元件O，一个启动子P和一个调节基因I（是调节基因，编码产生阻遏蛋白）。

?试述乳糖操纵子的负性、正性调节机制。

一、阻遏蛋白的负性调节：没有乳糖存在时，I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处，抑制RNA聚合酶与启动子结合，乳糖操纵子处于阻遏状态，不能合成分解乳糖的三种酶；有乳糖存在时，乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构，不能结合于操纵序列，乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。所以，乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。

二、CAP的正性调节：lac启动子是弱启动子，在启动子上游有CAP结合位点，当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时，cAMP浓度升高，与CAP结合，使CAP发生变构，CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点，激活RNA聚合酶活性，促进结构基因转录，调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录，对乳糖操纵子实行正调控，加速合成分解乳糖的三种酶。

?以乳糖操纵子例，说明细菌基因表达的调控原理；

1、乳糖操纵子（lac operon）的组成：大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵元件O，一个启动子P和一个调节基因I（是调节基因，编码产生阻遏蛋白）。

2、阻遏蛋白的负性调节：没有乳糖存在时，I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处，抑制RNA聚合酶与启动子结合，乳糖操纵子处于阻遏状态，不能合成分解乳糖的三种酶；有乳糖存在时，乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构，不能结合于操纵序列，乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。所以，乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。

3、CAP的正性调节：lac启动子是弱启动子，在启动子上游有CAP结合位点，当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时，cAMP浓度升高，与CAP结合，使CAP发生变构，CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点，激活RNA聚合酶活性，促进结构基因转录，调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录，对乳糖操纵子实行正调控，加速合成分解乳糖的三种酶。 4、协调调节：乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制，互相协调、互相制约。

?当培养基中葡萄糖和乳糖共同存在时，细菌先利用哪一种糖？为什么?

1）乳糖操纵子由启动子、操作基因和编码β-半乳糖苷酶、通透酶和乙酰基转移酶的结构基因组成(这三个酶参与乳糖代谢)。若葡萄糖和乳糖共同存在时，细菌首先利用葡萄糖。

2）当葡萄糖存在时，其代谢产物使得cAMP的浓度降低，使CAP处于失活状态(其不能单独结合于CAP位点)，RNA聚合酶不能结合于乳糖操纵子上，使得三个酶的基因不能转录，从而细菌也不能利用乳糖。葡萄糖对Lac操纵子的阻遏作用称为分解代谢阻遏。

?反式作用因子结构域模式极其特点；

反式作用因子结构域具有多种结构模式： 1、DNA结合域有不同的结构模式：①锌指结构借助半胱氨酸和组氨酸与锌离子结合；②同源结构域具有螺旋－回折－螺旋结构：许多反式作用因子结合DNA的结构域中具有一段相同的保守序列，是60个左右氨基酸组成的螺旋－回折－螺旋结构的区域，称为同源结构域（homeodomain,HD）,简称同源域。③亮氨酸拉链结构使两个单体结合并形成DNA结合域。④螺旋-环－螺旋结构易于形成二聚体⑤碱性α-螺旋含较多的碱性氨基酸。2、转录活化结构域是反式作用因子的转录激活区。其模型有：①酸性α-螺旋结构。带有负电荷的α-螺旋区。②富含谷氨酰胺结构域存在于多种转录因子中。③富含脯氨酸结构域 常与DNA结合结构域相连。 反式作用因子三个基本特征

①一般具有三个功能域：DNA识别结合域、转录活性域和结合其他蛋白结合域； ②能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件；

③对基因的表达有正性或负性调控作用，激活和阻遏基因的表达。

?试述PCR技术的基本原理和主要用途。

原理：依据DNA半保留复制的机理；体外DNA分子于不同温度下可变性和复性的性质。作为引物的一对寡核苷酸与模板DNA同源序列按照碱基互补配对原则形成局部双链，然后在TaqDNA聚合酶作用下引导新链DNA的合成，经过25-30个变性、退火和延伸的循环，获得特异性的DNA片段扩增产物。

用途：目的基因的克隆、基因突变、DNA和RNA的微量分析、DNA序列测定、基因突变分析

1?试述Southern印迹技术的基本步骤。

DNA样品经限制性内切酶消化后行琼脂糖凝胶电泳，将含有DNA区带的凝胶在变性溶液中处理后，再将胶中的DNA分子转移到NC膜上。转移完成后，在80°真空条件下加热或在紫外交联仪内处理，使DNA固定于NC膜上，即可用于杂交反应。

2?试述Northern blot杂交的操作步骤？

①RNA的变性琼脂糖电泳；②将硝酸纤维薄 膜放在含有RNA电泳条带的凝胶上；③转印盘中的转移缓冲液将逐渐为胶和膜上覆盖的吸水纸吸收，从而利用④毛细作用将胶中的变性RNA分子转移到硝酸纤维薄膜上；⑤转印完成后，使RNA分子固定到膜上；⑥膜上的RNA分子与探针杂交；⑦经放射自显影或其他检测技术显示出杂交区带。

?1、mRNA结构特点：

①真核生物mRNA的5‘末端有特殊帽结构。②真核生物mRNA的3 ?末端有多聚腺苷酸。③mRNA的碱基序列决定蛋白质的氨基酸序。 ?2、tRNA的结构特点：

1. tRNA含有多种稀有碱基（占10%～20%）。2. tRNA含有茎环结构。3. tRNA的3?-末端可连接氨基酸。

?简述真核生物的RNA加工。

包括：5’端加帽、内含子剪接与3’端的聚腺苷酸化。其中最复杂的是剪接。 （1）第一个RNA加工事件是加帽，在转录刚进入延伸阶段时就进行。帽子结构维持mRNA的稳定；与帽结合蛋白复合体结合，参与翻译过程。 （2）内含子的剪接包含两次转酯反应。 ①分支点的一个A的2’-OH攻击5’-剪接位点的磷酸二酯键，生成上游外显子的3’-OH ；

②上游外显子末端的3’-OH攻击3’-剪接位点的磷酸二酯键，释放呈套索状的内含子。

（3）聚腺苷酸化与转录终止密切相关，当聚合酶到达基因末端，就会遇到一个特殊序列，而引发mRNA切割、聚腺苷酸化和转录终止。

?真核生物mRNA转录后加工。

一、核不均一RNA经首、尾修饰和剪接后成为mRNA：（一）前体mRNA在5?-末端加入“帽”结构;（二）前体mRNA在3?-端特异位点断裂并加上多聚腺苷酸尾 .（三）前体mRNA的剪接主要是去除内含子

二、真核rRNA前体经过剪接形成不同类别的rRNA . 三、真核生物前体tRNA的加工包括核苷酸的碱基修饰. 四、RNA催化一些真核和原核基因内含子的自剪接

五、RNA在细胞内的降解有多种途径.（一）依赖于脱腺苷酸化的mRNA降解是重要的mRNA代谢途径.（二）无义介导的mRNA降解是重要的真核细胞mRNA质量监控机制.

?简述真核细胞mRNA5(端的“帽”和3(端的poly(A)尾结构作用。

（1） 5?加帽的作用在于：①有助于保护mRNA免于被核糖核酸酶降解；②协助mRNA的剪接。在剪接第一个外显子时，剪接体的形成需要帽结合蛋白的参与；③促进mRNA从细胞核运输到细胞浆；④5?帽结合蛋白复合体参与mRNA和核糖体的结合来起始翻译 。

（2）poly(A)尾的作用：poly(A)尾可结合一种或多种特殊蛋白，避免mRNA被酶降解，并在翻译过程中具有重要作用。许多原核mRNA也含有poly(A)尾，但是此尾的功能是促进mRNA降解，而不是保护mRNA免于被降解。

?试分别叙述信使RNA（mRNA）、转运RNA（tRNA）的结构与功能。

（1）mRNA结构特点： ①大多数真核mRNA的5′末端均在转录后加上一个7-甲基鸟苷，同时第一个核苷酸的C′2也是甲基化，形成帽子结构：m7GpppNm-。②大多数真核mRNA的3′末端有一个多聚腺苷酸(polyA)结构，称为多聚A尾。③开放阅读框：mRNA中以AUG起始，以UAA（或UAG、UGA）终止的区域称为开放阅读框，它是蛋白质的编码区。

mRNA的功能：把DNA所携带的遗传信息，按碱基互补配对原则，抄录并传送至核糖体，用以决定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。

( 2 ) tRNA的一级结构特点：①含 10~20% 稀有碱基；②3′末端序列为 - CCA，这是tRNA结合氨基酸的位点（氨基酸受体臂） tRNA的二级结构——三叶草形 tRNA的三级结构—— 倒L形

tRNA的功能：活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译。

?RNA聚合酶催化的转录的步骤组成。

为转录一个基因，RNA聚合酶必须进行一系列定义明确的步骤，包括：起始

（initiation）、延伸（elongation）、终止（termination）。

（1）起始：启动子（promoter）是RNA聚合酶识别、结合并启动转录的DNA序列。

启动子-聚合酶复合体一旦形成就发生结构改变，而使起始过程继续进行，形成转录泡。

（2）延伸：一旦RNA聚合酶已经合成了一小段RNA（10bp），转录进入延伸阶段。 （3）终止：一旦RNA聚合酶转录了整个基因（获整组基因），它必须停下来并释放

RNA产物，该步骤称为终止。

?受体的类别和结构特点。

(1)受体分为细胞内受体和细胞膜受体，细胞膜受体又分为离子通道受体、G-蛋白偶联受体、单次跨膜受体。

（2）三种膜受体的结构特点比较

特性 离子通道受体 G-蛋白偶联受体 单次跨膜受体 内源性配神经递质 神经递质、激素、趋化因子、生长因子 体 外源刺激（味，光） 细胞因子 结构 寡聚体形成的单体 具有或不具有催化活性的单孔道 体 跨膜区段4个 7个 1个 数目 功能 离子通道 激活G蛋白 激活蛋白酪氨酸激酶 细胞应答 去极化与超极去极化与超极化调节蛋白调节蛋白质的功能和表达水化 质功能和表达水平 平，调节细胞分化和增殖

?配体—受体作用的特点

（1）有高度专一性：受体选择性地与特定配体结合,这是由分子的几何形状决定的,

两者的结合通过反应基团的定位和分子构象的相互契合而实现. （2）有高度亲和力

（3）可饱和性：增加配体至一定浓度,可使受体饱和.

（4）可逆性：受体与配体以非共价键结合,当生物效应发生后,配体与受体解离. （5）特定的作用模式：受体在细胞内的分布有组织特异性,有特定的作用模式,受体与

配体结合后,能引起特定的生理效应.

?cAMP-PKA通路；IP3\\DAG-PKC通路；受体型TPK－Ras-MAPK通路转到途径作用特点。

（1）cAMP-PKA通路

组成：胞外信息分子、受体、G蛋白、腺苷酸环化酶 (AC)、cAMP、蛋白激酶 A(PKA) 作用特点：①以靶细胞内cAMP浓度改变和PKA激活为主要特征。 ②胰高血糖素、肾上腺素、促肾上腺皮质激素等可激活此通路。

③PKA活化后，可使多种蛋白质底物的丝/苏氨酸残基发生磷酸化，改变其活性状

态，底物分子包括一些糖代谢和脂代谢相关的酶类、离子通道和某些转录因子。主要起到调节代谢、调节基因表达。

（2）IP3\\DAG-PKC通路

作用特点：①促甲状腺素释放激素、去甲肾上腺素、抗利尿素与受体结合激活G蛋白，激活PLC。

②PLC水解膜组分PIP2，生成DAG和IP3。

③IP3：促进细胞钙库内的Ca2+迅速释放，胞质内Ca2+浓度升高。 ④DAG：在磷脂酰丝氨酸和Ca2+协同下激活PKC （3）受体型TPK－Ras-MAPK通路（TPK为受体酪氨酸激酶，MAPK系统包括MAPK、MAPK

激酶、MAPKK激酶）

作用特点：① 胞外信号分子与受体结合，导致第一个蛋白激酶被激活。有的受体自身具蛋白激酶活性。有些受体自身没有蛋白激酶活性，通过蛋白质-蛋白质相互作用激活某种蛋白激酶；

② 通过蛋白质-蛋白质相互作用或蛋白激酶的磷酸化修饰作用激活下游信号转导分子；

③ 蛋白激酶通过磷酸化修饰激活代谢途径中的关键酶、转录调控因子等，影响代谢通路、基因表达、细胞运动、细胞增殖等。

?试述受体型PTK-Ras-MAPK途径的信息传递过程。

①受体与配体结合后形成二聚体，激活受体的蛋白激酶活性。

②受体自身酪氨酸残基磷酸化，形成SH2结合位点，从而能够结合含有SH2的结构域

的接头蛋白Grb2。

③Grb2的两个SH3结构域与SOS分子中的富含脯氨酸序列结合，活化SOS。 ④活化的SOS结合Ras蛋白，促进Ras释放GDP、结合GTP

⑤活化的Ras蛋白激活MAPKKK,活化的MAPKKK可磷酸化MAPKK而将其激活，活化的

MAPKKK将MAPK磷酸化而激活。 ⑥活化的MAPK转位至细胞核内，通过磷酸化作用激活多种效应蛋白，从而使细胞对外

来信号产生生物学应答。

?胞内受体介导的信号转导途径。

细胞内受体的本质是激素激活的基因调控蛋白。在细胞内，受体与抑制性蛋白（如Hsp90）结合形成复合物，处于非活化状态。配体（如皮质醇）与受体结合，将导致抑制性蛋白从复合物上解离下来，从而使受体暴露出DNA结合位点而被激活。这类受体一般都有三个结构域：位于C端的激素结合位点，位于中部富含Cys、具有锌指结构的DNA或Hsp90结合位点，以及位于N端的转录激活结构域。

?良好载体的条件

1、必须有自身的复制子； 2、载体分子上必须有限制性核酸内切酶的酶切位点,即多克隆位点,以供外源DNA插入； 3、载体应具有可供选择的遗传标志,以区别阳性重组子和阴性重组子； 4、载体分子必须有足够的容量； 5、可通过特定的方法导入细胞；

6、对于表达载体还应具备与宿主细胞相适应的启动子,前导顺序,增强子,加尾信号等

DNA调控元件.

?1、原核生物DNA聚合酶的种类及意义

DNA-polⅠ：对复制中的错误进行校读，对复制和修复中出现的空隙进行填补。（5’(3’聚合酶活性；5’( 3’外切酶活性；3’( 5’外切酶活性。）

DNA-pol Ⅱ：损伤的DNA模板上，它也能催化核苷酸聚合。因此认为，它参与DNA损伤的应急状态修复。

DNA-pol

Ⅲ：有促进全酶组装至模板上及增强核心酶活性的作用

?2、真核生物DNA聚合酶的种类及意义

DNA-polɑ ：?起始引发，有引物酶活性。 DNA-polβ ：参与低保真度的复制 。

DNA-polγ：在线粒体DNA复制中起催化作用。 DNA-polδ：延长子链的主要酶，有解螺旋酶活性。

DNA-polε：在复制过程中起校读、修复和填补缺口的作用。

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