Hedgehog信号转导通路下游转录因子Gli1在人神经胶质瘤中对水通道(4)

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质粒

真核表达质粒由谢经武教授惠赠

在人胶质瘤中对水通道蛋白调控作用的研究 一表达质粒干扰质粒报告基因质粒 一一一一一质粒均由本室构 建

细胞及培养用主要试剂及制备方法

人胚肾上皮细胞人神经胶质瘤细胞购自中科院细胞库 液体培养基取培养基于粉 公司包加入碳 酸氢钠

完全培养基液体培养基添加胎牛血清三抗 三抗青霉素链霉素庆大霉素配成 后的除菌滤膜过滤保存备用 胎牛血清购自 公司 胰蛋白酶购自 公司 细胞冻存液 液体培养基 二甲基亚砜 主要缓冲液

裂解液

临用前加入

×凝胶加样缓冲液 溴酚蓝甘油

嘶在去离子水中溶解碱和甘氨酸然后加入 的电泳级储存液用离子水补至则成 储存液室温密闭保存 蛋白转移缓冲液甘氨酸碱 甲醇 丽春红三氯 醋酸磺基水杨酸

第二军医大学博士学位论文

封闭液脱脂奶粉溶解 缓冲液的配制

称取碱加入去离子水磁力搅拌下完全溶解 用约

浓盐酸调节值至去离子水定容至 室温保存备用

碱加入去离子水磁力搅拌下完全溶解 称取 用约 室

浓盐酸调节值至去离子水定容至 温保存备用

称取 加入去离子水磁力搅拌下完全溶 解用约

浓盐酸调节值至去离子水定容至 室温保存备用

加入去离子水磁力搅拌下完全溶 称取 解用约

浓盐酸调节值至去离子水定容至 室温保存备用 处 用

理的去离子水充分溶解加数滴浓调节值至并将体积调节至 保存

在的条件下溶解于去离了 十二烷基磺酸钠

水中加数滴浓盐酸调节值至冷却后去离子水定容至室温 保存 二

主要仪器和设备 仪型

紫外分光光度计 型

一超低温冰箱型 机型

在人胶质瘤中对水通道蛋白调控作用的研究 各种离心机 型型 型 转膜仪

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