电针对MCAO大鼠海马微循环血流量的影响(2)

　　2.4 针刺方法曲池、足三里组取左侧曲池、足三里，人中内关组取人中及左侧内关，电针频率为4～16 Hz，波型为间断疏密波, 刺激强度为1V, 时间为30 min，于15 min时交换电极，1次/d。以上两组均在模型复制成功后第2天开始针刺，连续针刺2 d。假手术对照组及模型组除不针刺外，亦经过抓取、固定等过程。

　　2.5 微循环监测方法各组大鼠均于第2天针刺时监测右侧海马CA1区微循环。大鼠戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，俯卧位固定于脑立体定位仪上，头皮正中切口，以前囟和矢状缝的交点作为中点，在向后4 mm，右侧旁开2 mm处用10号针头钻一孔，将探头通过立体定位仪经此孔垂直入脑2 mm，置于海马CA1区，即可应用激光多普勒微循环血流仪实时检测微循环的血流量。大鼠稳定10min后开始电针，记录电针前5 min，电针1，10，20，30 min，停针后20，40，60 min的微循环血流量，以观察时间1 min内的平均微循环血流量作为该观察时间的微循环血流量。

　　2.6 统计学处理实验数据以±s表示，同时间不同组采用单因素方差分析，同组不同时间采用配伍组方差分析，以P<0.05为差异具显著性。

　　3 结果

　　结果显示，与同时间点假手术组相比较，模型组、人中内关组及曲池足三里组大鼠海马CA1区微循环血流量在各时间点均降低，大部分时间点有显著性差异(P<0.01，P<0.05)。

　　模型组大鼠海马CA1区微循环血流量在电针30 min后与电针前相比明显下降(P<0.05)。人中内关组大鼠海马CA1区微循环血流量电针后呈升高趋势，至电针30 min时升至最高，然后缓慢下降，至停针后60 min时比同组电针前升高15%，但电针后各时间点与电针前相比不具有显著性差异。曲池足三里组大鼠海马CA1区微循环血流量在电针10 min后明显下降,与电针前相比具有显著性差异(P<0.05)。结果见表1。表1 电针对MCAO大鼠海马CA1区微循环血流量的影响与同时间假手术对照组比较，*P<0.01;与同时间假手术对照组相比较，&P<0.05 ; 与同组电针前相比较，#P<0.05; n=8

　　4 讨论

　　研究脑血流的方法较多。目前激光多普勒血流计 (laser doppler blood flow monitor ，LDF)逐渐发展成为神经科学研究的重要工具。LDF原理是采用单色的内聚激光，以一可传递的光学纤维传递到生理组织。从移动的物体上反射的激光会出现多普勒效应，即频移。而周围静止结构反射的激光频率不变。反射光信号通过光学纤维传入探测器，由探测器通过探测频移，测定红细胞的速度。

　　LDF以多普勒效应为检测基础，无需吸入或注射任何药物，不用等候检测时机，可随时进行检测。瞬时测量时间为0.1 s，可以迅速反馈血流变化，具有简单、连续、实时、微创等特点。但是影响LDF测量值的因素较多，如组织牵拉、探头移位、光导纤维的摆动、呼吸幅度的改变等均可产生赝像波，实验中应予以重视。

　　传统治疗中风病也多采用“治痿独取阳明”的疗法，故实验另外选取曲池、足三里进行针刺。据报道在正常和高血压状态下，针刺曲池、足三里能显著降低大鼠血压[2]。针刺大鼠足三里能够诱发支配穴位的特异性外周神经放电，推测该神经信号可能通过躯体心血管反射参与调节体内的血压变化[3]。电针足三里能够减少延髓头端腹外侧区内谷氨酸释放量，降低应激性高血压大鼠的血压[4]。而电针曲池穴可抑制两肾一夹高血压大鼠血压的升高，其降压机制可能与其综合抑制肾素一血管紧张素系统有关[5]。本实验结果显示电针曲池、足三里可使MCAO大鼠右侧海马CA1区微循环血流量降低，推测可能与上述神经体液调节机制相关。

　　本实验所选用的“人中”和“内关” 两穴是“醒脑开窍” 针法中的两个主要穴位，人中穴也称水沟穴,为督脉腧穴,具有醒神开窍、回阳救逆等功能。内关是心包经穴，具有宁心安神的作用。据报道电针人中、内关能抑制急性脑缺血模型大鼠血清NO、NOS、ET-1的过度升高从而调节微血管舒缩[6]，本实验结果显示电针人中、内关对MCAO大鼠右侧海马CA1区微循环血流量无明显影响，推测不同穴位对微循环的调节效应有一定差异，计划在以后的实验中，尝试改变脑缺血造模方法，改进针刺时机，延长微循环监测时间来进一步证实电针人中、内关对脑缺血大鼠海马微循环血流量的影响。

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