应用响应曲面法优化紫茎泽兰中黄酮的提取工艺(2)

　　2.4 提取方法称取一定量的紫茎泽兰粉末于圆底烧瓶中，按照实验预先安排的因素和水平用一定浓度和体积的乙醇溶液提取，将提取液趁热过滤后，转入分液漏斗中用石油醚萃取3次，将下层清液转入容量瓶中，并用60%的乙醇溶液定容至刻度线作为待测液，取一定量待测液用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色法在560 nm处测定吸光度并计算出提取率。

　　3 结果

　　3.1 单因素实验结果

　　3.1.1 料液比对提取率的影响见图1。从图1可以看出，料液比越小提取率越高，当料液比为1∶30(g∶ml)时提取率最高。有此可见，在实验范围内，增加溶剂用量能显著提高提取率，但提取率的增幅越来越小，因此没有继续提高溶剂用量。

　　图1 料液比对提取率的影响

　　3.1.2 提取时间对提取率的影响见图2。从图2可以看出，提取时间为3h提取率最高，当提取时间再增加，提取率明显下降。

　　图2 提取时间对提取率的影响

　　3.1.3 乙醇浓度对提取率的影响见图3。从图3可以看出，乙醇溶液质量分率为0.6时提取率最高，当超过0.6时提取率大幅下降。

　　图3 乙醇浓度对提取率的影响

　　3.1.4 提取温度对提取率的影响见图4。从图4可以看出，当温度在70℃时提取率达到最高，当温度继续升高时，提取率随温度的升高反而减小。

　　图4 提取温度对提取率的影响

　　3.2 二次回归正交组合设计实验结果

　　3.2.1 实验设计表以及试验结果根据回归正交组合设计方法，选取料液比z1，时间z2，浓度z3，温度z4，4个因素编制实验设计表，并将实验结果列入表2。

　　3.2.2 回归方程的建立以及检验

　　回归方程方差分析：结果见表3。

　　回归方程的失拟性检验：结果见表4。表4表明回归方程的失拟性不显著。

　　二次回归模型参数及其显著性检验：结果见表5。根据表5可确定如下回归方程：Y=1 520.348-190.853Z1+57.588Z2-49.967Z3+57.981Z4+42.355Z2Z4+40.855Z3Z4-95.3Z'2+35.692Z13+70.23Z14

　　3.3 黄酮类物质提取工艺的响应曲面分析及优化在其它因素保持不变的情况下，可以得到任意的二因素及其交互作用对提取率的二次方程，得到一组动态响应曲面图(见图5)，从而确定最佳的工艺条件。　表2 回归正交设计表及实验结果表3 方差分析结果表4 回归方程失拟性检验结果表5 回归方程失拟性检验结果

　　将中心化公式以及编码公式代入回归方程，通过分析二次响应曲面可以得出紫茎泽兰中黄酮的提取工艺的最优条件是料液比为1∶30(g/ml)，提取时间为2.6 h，乙醇浓度为50%，提取温度为64℃。

　　4 结论

　　在单因素实验的基础上使用二次响应曲面法建立了数学模型，利用模型的响应曲面图得到优化的工艺条件：料液比为1∶30(g∶ml)，提取时间为2.6 h，乙醇浓度为50%，提取温度为64℃，此时黄酮的提取率可达到1 955.322　μg/mg，利用响应曲面法对紫茎泽兰中黄酮提取工艺的优化能有效地减少实验的盲目性，为紫茎泽兰的综合利用提供理论依据。

【参考文献】
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