五指毛桃水提液体外抗菌作用的实验研究

               作者：王晓平,段丽菊，陈晓白，李丽梅，陆奇丰，李鉴清

【摘要】  目的研究五指毛桃水提液体外抗菌作用，为其在临床的应用提供依据。方法制备五指毛桃水提液，采用圆滤纸片法测定其对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉、黄曲霉的抗菌效果;采用圆滤纸片-二倍连续稀释法测定其最低抑菌浓度。结果在一定的浓度下，五指毛桃水提液对大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌均具有抑制作用，最低抑菌浓度均为1g /ml，而对黑曲霉、黄曲霉没有抑制作用。结论五指毛桃水提液对细菌具有较强的抑制作用，具有良好的开发前景。

【关键词】  五指毛桃; 体外抗菌; 最低抑菌浓度

　五指毛桃Radix fici Hirtae为桑科植物粗叶榕Ficus hirta Vah1.的干燥根，又名“南芪”“五爪龙”“五指牛奶”“土北芪”[1]。五指毛桃味辛、甘，性平，具有健脾利湿、益肺止咳、舒筋通络的功效，在临床上主要用于治疗脾虚浮肿、食少无力、肝炎、风湿痹痛、肺痨咳嗽等症[2]。原植物分布在我国南部及西南部地区，因疗效独特而在华南地区较为广泛地应用。五指毛桃具有抗炎镇痛作用，在临床上用来治疗慢性盆腔炎、慢性支气管炎、肝炎、膀胱炎、肺结核等病[3，4]。但其药理研究报道较少，本文初次对其水提液的抗菌作用进行了研究，为其在临床的应用提供实验依据。

         1 材料

　　1.1 实验菌种金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus，枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis，大肠杆菌Escherichia coli，黑曲霉Aspergillus niger，黄曲霉Aspergillus flavus均由本系微生物与制药工程实验室提供。

　　1.2 试剂和仪器五指毛桃购于玉林市中药材市场。牛肉膏蛋白胨培养基，查氏培养基。细菌培养箱、低温离心机等。

　　2 方法

　　2.1 五指毛桃水提液的制备称取五指毛桃200g，加蒸馏水10倍，浸泡1h，加热煮沸后文火煎煮2h，趁热滤取药液。药渣再加5倍水，煎煮1h后取滤液。2次滤液合并后，加热浓缩，药液浓缩至4g/ml。115℃灭菌30 min，置4℃冰箱保存备用[5]。

　　2.2 细菌悬液的制备将菌种分别接种到相应斜面培养基上，置于恒温箱中活化，细菌和霉菌的活化条件分别为28℃下培养48h、37℃下培养24h。经活化后的菌种用生理盐水稀释到106CFU/ml。

　　2.3 体外抗菌实验

　　2.3.1 抑菌圈的测定采用圆滤纸片法。取已灭菌的6 mm圆滤纸片，浸入五指毛桃水提液中浸泡2h后取出，放到无菌操作台中晾干。将5种菌悬液各取0.1 ml分别涂布于相应的培养基中，制成含菌平板。用灭菌镊子夹取圆滤纸片置于含菌平板表面，每个平板放3片，各滤纸片的距离大致相等，纸片距平板边沿大于1 cm，用灭菌蒸馏水设阴性对照，每个菌种做3个平行。将平板置于恒温箱中培养(细菌37℃下培养24 h，霉菌28℃下培养48 h)。用游标卡尺测其抑菌直径，取3个平行的平均值[6]。

　　2.3.2 最低抑菌浓度的测定采用圆滤纸片-二倍连续稀释法。取五指毛桃水提液原液5ml，二倍递减浓度稀释,即将药液依次按1∶2，1∶4，1∶8，1∶16，1∶32的比例进行稀释,最终药液的质量浓度依次为2，1，0.5，0.25，0.125 g/ml。取已灭菌的圆滤纸片分别浸入上述提取液中浸泡2h，置于无菌操作台晾干。其余操作同“2.3.1”项。以有抑菌圈的最低浓度为五指毛桃的最低抑菌浓度[7]。

　　3 结果

　　3.1 抑菌圈测定结果五指毛桃对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉和黄曲霉这5株菌种的抑菌圈直径测定结果见表1表1 五指毛桃水提液对5株菌种的抑菌圈直径mm由表1可知，五指毛桃水提液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有明显的抑制作用，而对黑曲霉、黄曲霉无抑制作用。

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