优化探究届高考生物一轮复习第十一单元现代生物科技专题第一讲基(2)

________________________________________________，一般可采用________技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。但在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的________细胞中特异表达。

解析：(1)目的基因的获取一般有3种方法，即PCR技术扩增、人工合成、从基因文库中获取。(2)切割基因的酶是限制性核酸内切酶。基因和DNA都是两条链，具有相同的结构基础是其能重组的原因。(3)若受体细胞是动物细胞，一般选用显微注射法将目的基因导入受体细胞。常用的受体细胞是受精卵，因其较易表现出全能性。检测外源基因是否导入受体细胞常用DNA分子杂交技术。膀胱生物反应器要用膀胱上皮细胞作为受体细胞。

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答案：(1)PCR技术扩增 人工合成

(2)限制酶 人的生长激素基因和小鼠DNA分子的空间结构、化学组成相同 转化 (3)显微注射法 受精卵(早期胚胎) 受精卵(或早期胚胎)具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达 DNA分子杂交 膀胱上皮

5．(2016·莆田质检)利用乳腺生物反应器获取药用蛋白具有产量高、成本低等优点。如图为培育转基因奶牛获得人血清白蛋白的流程。

请回答：

(1)PCR扩增人血清白蛋白基因使用的酶是________________。要使人血清白蛋白基因在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，应将其与________基因的启动子等调控组件重组。

(2)过程②包括________技术和胚胎移植技术；可用________技术获得多只与该转基因奶牛遗传物质相同的牛犊。

(3)若要检测牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用________________技术。

解析：(1)PCR扩增过程中用到的酶是热稳定DNA聚合酶；为使目的基因仅在牛的乳腺细胞中表达，构建基因表达载体时需在目的基因的首端加上牛乳腺蛋白基因的启动子。(2)过程②需将已导入目的基因的受精卵培养至早期胚胎，然后再将胚胎移植到受体奶牛子宫中进行发育；利用胚胎分割技术可将一个胚胎分割成多个遗传物质相同的胚胎，并各自发育成一个牛犊。(3)鉴定蛋白质的方法是抗原—抗体杂交法。

答案：(1)热稳定DNA聚合酶(Taq酶) 牛乳腺蛋白(乳腺蛋白) (2)早期胚胎培养(动物细胞培养) 胚胎分割 (3)抗原—抗体杂交

6．如图为绿色荧光小鼠制备流程图，Gfp是绿色荧光蛋白基因，请分析回答：

(1)构建表达载体需要的酶是：___________________________________，

表达载体包含绿色荧光蛋白基因Gfp、________、______________、终止子和复制原点等。 (2)图中载体上的Neo基因是一种抗生素抗性基因，图中步骤③所用的G418是一种抗生素(对

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细胞有毒害作用)，添加G418的目的是______________________。 (3)图中所用的胚胎干细胞来自___________________________。

(4)图中步骤⑤要将细胞注射入图中囊胚的________位置，图中步骤⑥胚胎移植前要对代孕母鼠用激素处理，目的是________。

(5)可以使用________方法在蛋白质水平上鉴定小鼠是否存在绿色荧光蛋白。

解析：(1)基因表达载体需包含目的基因(绿色荧光蛋白基因Gfp)、启动子、终止子、标记基因等。(2)载体上的Neo基因是一种抗生素抗性基因，属于标记基因，在培养基上添加抗生素G418后可用于筛选含有目的基因的受体细胞。(3)胚胎干细胞来自于早期胚胎或原始性腺。(4)由图知，植入的胚胎干细胞是在囊胚的内细胞团上进行发育的。(5)鉴定蛋白质的方法是抗原—抗体杂交法。

答案：(1)限制性核酸内切酶、DNA连接酶 标记基因 启动子 (2)筛选出导入目的基因的胚胎干细胞 (3)早期胚胎或原始性腺 (4)内细胞团 同期发情处理 (5)抗原—抗体杂交

7．(2016·武汉调研)如图是利用基因工程方法培育抗虫棉的过程。请回答相关问题：

(1)从苏云金芽孢杆菌的DNA上获取抗虫基因，需要用到的工具是________，此工具主要是从________生物中分离纯化出来的，它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的________键断开。

(2)构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有________，它能把目的基因整合到受体细胞________。

(3)E过程是利用________技术完成的，要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做________实验。

(4)将目的基因导入植物细胞，除采用图中的方法外，还可采用________法和花粉管通道法。 解析：(1)限制酶用于切割DNA分子，获取目的基因。限制酶主要从原核生物细胞中获取。限制酶可断裂磷酸二酯键，将DNA分子切开。(2)Ti质粒是可转移的DNA，其上

NA可以

整合到受体细胞的染色体DNA上，故将目的基因借助Ti质粒导入受体细胞中。(3)E过程利用了植物组织培养技术。可把害虫接种到转基因植株上，以检测转基因植株的抗虫基因是否正常表达。

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答案：(1)限制酶 原核 磷酸二酯 接种 (4)基因枪

染色体DNA (3)植物组织培养 抗虫的

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