体外培养刺五加生产刺五加苷B、E的研究(3)

　　2.3  培养基对刺五加苷B、E产量的影响MS培养基和1/2MS培养基处理培养60 d后，对刺五加苷B、E产量的影响如表3所示。

    MS培养基处理中体细胞胚胎的刺五加苷B含量显著高于1/2MS培养基处理的含量，刺五加苷E含量在两者之间差异不大。MS培养基中培养物质量略高于1/2MS培养基。在相同条件下培养60 d后MS培养基的刺五加苷B、E产量略优于1/2MS培养基的处理。表3  培养基类型对刺五加苷B、E产量的影响（略）

　　3  讨论

    利用组织培养生产药用植物次生代谢产物过程中，一般来讲，利用疏松易碎，生长速度快，利于悬浮培养的愈伤组织作为体外培养物较为多见，如红豆杉、茜草等［8］。刺五加在体外培养过程中较容易形成愈伤组织，接种后2周，即从切口处即可见淡黄色、颗粒状的愈伤组织产生，4周后整个外植体完全被愈伤组织所覆盖。将之每隔4周继代入相同培养基，可使其长期保持生命力［9］。但与其他植物不同的是，刺五加具备较好的愈伤组织发生能力的同时也具有良好的体细胞胚胎发生能力，且其体细胞胚胎自产生的同时其上即可产生大量的次级体细胞胚胎，次级体胚能继续产生三级、四级体胚［4］，加之体细胞胚胎中刺五加苷B、E含量较之愈伤组织更高，因此利用体细胞胚胎生产刺五加苷B、E更为便利。
   
　　在多数植物中，2,4-D只对胚性细胞或细胞团的形成起到诱导作用，而对体细胞胚胎的进一步发育与生长却是抑制的因素。但对于刺五加而言，不管其体胚发生途径如何，2,4-D对胚性细胞的诱导及体胚的分化均起到了促进作用［4］，而不同浓度处理中的刺五加苷B、E含量和质量间差异不大，因此对于利用体细胞胚胎生产刺五加苷B、E而言，从成本的角度出发，未添加激素的培养基较为适宜。

    MS培养基较之1/2MS培养基，大量元素增加1倍，其它成分相同。即在其它条件相当的情况下MS培养基中N源为1/2MS培养基的2倍。与天山雪莲组织培养中，提高培养基中NH4NO3浓度，有利于愈伤组织生长和总黄酮的形成相似［10］，MS培养基中刺五加的体细胞胚胎质量和刺五加苷B、E含量均略优于1/2MS培养基的处理。

【参考文献】
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　　［4］邢朝斌，沈海龙，赵丽娜，等.刺五加的体细胞胚胎发生研究［J］.中草药,2006,25(5):769.

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　　［6］邢朝斌，王明艳，马百成，等.体外培养刺五加变异的RAPD分析［J］.安徽农业科学, 2006,21:5489.

　　［7］劳凤云，李小娜，邢朝斌，等.HPLC法测定刺五加中刺五加苷B和刺五加苷E的含量［J］.现代预防医学,2008,35(12):2280.

　　［8］赵春梅.植物组织培养方法生产药用次生代谢产物研究进展［J］.现代生物医学进展, 2008,8(4):790.

　　［9］邢朝斌，沈海龙，刘 岩，等. 刺五加成熟种子的愈伤组织诱导及其RAPD分析［J］.种子，2006,25(7):44.

　　［10］贾景明，吴春福，吴立军，等.天山雪莲愈伤组织培养与次生代谢物形成的研究［J］.中药研究与信息,2005,7(7)：11.

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