人参皂苷Rg1对6-OHDA所致MES23.5神经细胞损伤的保护作用

                       作者：王明波 陈文芳 谢俊霞

【摘要】  目的 探讨人参皂苷Rg1对6-羟基多巴胺(6-OHDA) 所致MES23.5神经细胞损伤的保护作用。方法 MES23.5细胞常规培养，观察人参皂苷Rg1预处理对6-OHDA毒性作用的影响，MTT法观察细胞存活率，实时荧光半定量反转录聚合酶链反应(real time RT-PCR)观察酪氨酸羟化酶（TH）和Bcl-2基因的表达情况。结果6-OHDA可剂量依赖性地损伤MES23.5细胞(F=71.24,P<0.01)，人参皂苷Rg1预处理可对抗6-OHDA的毒性作用(F=14.63，P<0.01)；6-OHDA可明显降低TH和Bcl-2基因的表达，人参皂苷Rg1预处理可明显逆转上述改变(F=9.80、15.34，P<0.01)。结论 人参皂苷Rg1可明显对抗6-OHDA对MES23.5神经细胞的损伤，其作用机制可能与抗凋亡有关。 
【关键词】  人参皂甙类；羟基多巴胺类；神经元；细胞保护
    ［ABSTRACT］  Objective  To study the protective effect of ginsenoside Rg1 against 6-OHDA-induced neurotoxicity in MES23.5 cells.    Methods  MES23.5 cells were routinely cultured and pretreated with ginsenoside Rg1 to determine the protective effect of Rg1 against 6-OHDA-induced neurotoxicity. The cell viability was observed by MTT method. The gene expressions of TH and Bcl-2 were detected by real time RT-PCR method.  Results  6-OHDA induced cell death in a dose-dependent manner. Pretreatment with ginsenoside Rg1 had neuroprotective effects on cell viability against 6-OHDA-induced toxicity. 6-OHDA decreased the gene expressions of TH and Bcl-2. These effects could be reversed by Rg1 pretreatment.   Conclusion  Ginsenoside Rg1 has neuroprotective effects against 6-OHDA-induced neurotoxicity in MES23.5 cells, its mechansim may be related to its anti-apoptosis effects.
    ［KEY WORDS］  Ginsenosides; Hydroxydopamines; Neurons; Cytoprotection
    帕金森病（PD）是一种常见的中老年人中枢神经系统慢性退行性疾病，其主要病理改变是中脑黑质致密带（SNzc）多巴胺（DA）能神经元进行性变性，引起黑质（SN）-纹状体（Str）通路DA水平降低［1,2］。PD的病因迄今未明，发病机制十分复杂，研究认为其可能与氧化应激、兴奋性毒素、线粒体功能障碍、细胞凋亡机制等密切相关。目前对于PD尚缺乏有效的治疗方法，因此从不同的角度入手，探寻新的治疗方法是当前研究的热点。人参皂苷Rg1属于人参三醇类物质，是人参皂苷主要的活性成分之一。大量研究揭示，人参皂苷Rg1具有多种生物活性［3,4］，特别是在中枢神经系统，有抗衰老、抗氧化、益智及保护神经元免受毒性物质的损伤等作用。但人参皂苷Rg1对DA能神经元MES23.5细胞是否具有保护作用，目前尚未见报道。本实验应用6-OHDA损伤MES23.5神经细胞，建立PD的细胞模型，研究人参皂苷Rg1的神经保护作用，以期为PD的防治提供进一步的实验依据。
    1  材料与方法
    1.1  材料及其来源
    人参皂苷Rg1购自白求恩医科大学，其纯度为99.9%；DMEM/Ｆ12培养基购自Invitrogen公司（美国）；逆转录试剂盒购自Promega公司（美国）；SYBR Green染料购自Bio Rad公司（美国）；噻唑蓝（MTT）和胎牛血清均购自Gibco BRL公司，其余均为AR级。MES23.5细胞由乐卫东教授提供（美国贝勒医学院）。
    1.2  细胞培养及药物处理

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