大肠杆菌表达人IL21融合蛋白的纯化和抗原性分析(3)

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    本实验从活化扁桃体细胞中克隆出人IL21的cDNA并进行序列测定,同时构建了中国人IL21表达克隆,并在DH5α宿主菌中表达出与谷胱甘肽转移酶融合的蛋白。采用琼脂糖珠结合的纯化方法,获得了与理论值相符合的纯化条带。在进一步的Western Blotting分析中显示,该种条件下表达的融合蛋白能与IL2的单抗产生结合反应。这一实验结果结合人IL21最新的结构分析和体外活性实验,进一步证实了人IL21在临床与IL2联用或单独使用具有的调节免疫功能和抗肿瘤活性[2,7],并为进一步检测人IL21的各种体内外活性奠定了理论和实验的基础。
【参考文献】
    [1]PARRISHNOVAK J, DILLON SR, NELSON A, et al. Interleukin 21 and its receptor are involved in NK cell expansion and regulation of lymphocyte function[J]. Nature, 2000,408(6808):57. 

  [2]ASANO R, KUDO T, MAKABE K, et al. Antitumor activity of interleukin21 prepared by novel refolding procedure from inclusion bodies expressed in Escherichia coli[J]. FEBS Lett, 2002,528(1/3):70.

  [3]BRENNE AT, BAADE RO T, WAAGE A, et al. Interleukin21 is a growth and survival factor for human myeloma cells[J]. Blood, 2002,99(10):3756.

  [4]KASAIAN M T, WHITTERS M J, CARTER L L, et al. IL21 limits NK cell responses and promotes antigenspecific T cell activation: a mediator of the transition from innate to adaptive immunity[J]. Immunity, 2002,16(4):559569.

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