国家基金标书写作全攻略(3)

n理论创新：新学说或理论 n 方法创新：新方法

n 技术创新：技术改进或完善

4. 对国内外研究现状的了解（80分) n广度和深度：近5年的主要研究进展 研究中存在的主要问题

n参考文献： 国外文献 近5年 数量：20-30 二、研究方案（330分）

1. 研究内容和拟解决的关键问题（80分） n范围合适：3-5个内容 n重点突出：1-2个重点

n关键问题选择准确：1-2个关键问题 2. 技术路线（90分） n设计合理：基础与临床

n方法可行：成熟可靠 可重复性强 易于掌握 3. 研究方法及手段（90分） n方法先进： n技术成熟可靠： n有创新：

4. 研究的预期目标（70分）： 明确，可以达到，留有余地。 n发表的研究论文： n申请的技术专利： n可应用产品的开发： 三、研究基础 （250分）

1. 与本项目有关的工作积累（90分） n 主要研究者的研究背景及经验： n 与本研究相关的前期研究： 已发表的研究论文：n

2. 已具备的实验条件（80分） n 实验室条件：主要仪器和设备

技术条件：实验模型的建立,预实验的结果,关键实验材料n n国内及国际合作：合作的背景及技术优势 3. 项目组成员（80分） 主要成员6-10名，结构合理 n 高级研究人员（1-2人） n中级研究人员（2-3人） 技术人员及研究生（3-5人）n 四、经费预算 n人员费：5 % n 管理费：5 % 仪器费：《 n10% 合作费：《 10％n

实验材料费：60-70%( 五、专家委员会的意见

要对申请人及研究项目进行具体的评价： ( 学术水平：已经取得的成就 科学态度：人品及学风(

项目的重要性：理论意义及实用价值( ( 实验条件：能否满足研究需要 六、如何提高中标率 1. 精选课题申请人： 2. 预审标书并进行修改： 3. 优化组合研究队伍： 4. 孵化、扶植课题项目：

下面是一封可笑的广告信，基金委网站已经做过声明。但是我觉得内容很有可取之处，所以把有用的部分贴出来给大家参考。另外，请注意，千万不要找这些“专家”有偿咨询，有百害而无一利！

以下内容，请大家审慎地参考。

咨 询 通 知

在国家自然科学基金的申请课题中，只有少数项目是选题本身不够新颖，大多数项目是对研究内容、技术路线的阐述不够清楚和填写形式上存在漏洞而未中标。针对以上问题，我们通过对这些年课题评审情况进行深入研究，结合这几年对申请书进行修改的经验，组织在国家自然科学基金委员会工作多年的资深科研管理人员和参加评审的专家教授组成了咨询中心，对您的申请书提出详细、全面的修改意见（主要是与生命科学有关的课题）。

咨询内容：

1、简表填写是否规范，包括申请金额是否合理、投送学科是否恰当、参加人员技术力量的配备是否合适，等等；

2、选题方向是否科学、有创新、有科学意义，立项依据是否充分、清楚而没有漏洞，国内外的参考文献是否全面、准确；

3、目标、内容和关键问题的选择是否得当，叙述是否充分而有条理；

4、技术路线的设计和实验方案的选择是否先进、科学、合理、可行，描述是否清晰、简练； 5、工作基础中，是否将与课题的研究内容相关的研究工作，清楚、透彻、技巧地进行了阐述，使评审者对课题组的前期工作和科研条件有足够的了解和认识； 6、经费预算是否合理地按有关规定进行计算；

7、成员介绍是否紧扣课题的研究内容和技术路线，既注重梯队、比例、技术力量等科研综合实力的展示，又注意与本课题相关；

8、标书是否思路清晰、表达清楚，圆满而无漏洞，尤其是创新性、可行性和工作基础三方面的表述是否层次分明而又紧密结合、前后呼应。

众多各类基金的申请多数都是只看申请书的，申请书如何写得好，坛子里有很多贴子了。在这里我重点给不是很牛但又不得不去申请基金项目的同志几点建议。

1.如果你在理论上研究没有很大创新点，或者理论上无法做更多的文章的话，最好能将理论与实际结合起来，从两者结合点创新。

2.如果你不适合做理论研究，但比较擅长应用研究，不妨将实际与理论结合起来，从应用角度创新。

3. 你所述的每一句话都要慎重，不要让人看了反感，尤其不要过多的出现令人烦感的修饰语。平平淡淡最是真，只要能说明问题就行，不能夸夸其谈，好象整个学术界就你最牛，如果你真的很牛，就另当别论了。

4.一个好的题目是很重要的。当前的活跃领域，公认应解决的问题。 全面查阅文献、基金的资助项目情 况，认真阅读基金项目指南。

5.创新点选择：新问题，新方法;新问题，老方法;老问题，新方法。创新要从思想上创新或者方法上创新。

.新问题要体现前瞻性。

.老问题要强调目前的水平；准备部分或全面解决存在的问题；评述他人工作准确到位，实事求是；明确须解决的共性问题。

国家基金申请成功范本

二、立论依据

(包括项目的研究意义、国内外研究现状分析，并附主要参考文献及出处。) 对基础研究,着重结合国际科学发展趋势,论述项目的科学意义；

对应用基础研究,着重结合学科前沿、围绕国民经济和社会发展中的重要科技问题,论述其应用前景

1. 电子信息杂交策略及其在猪基因组研究中的应用现状

电子信息杂交策略是依据比较基因组定位结果，充分利用猪EST（expressed sequence tag, EST）数据库的信息资源，借助计算机辅助进行基因的克隆，又称为“silicon cloning”。其基本原理是利用研究深入、标记稠密的哺乳动物基因组保守功能基因的编码区序列（CDS）作为信息探针，在猪EST数据库筛选同源EST(s)(标准：长度≥100bp，同源性75%～95%) ，排除已克隆EST(s)后进行拼接，设计引物获取基因(cDNA) 全长（Altschul 等，1990；Mao等，1998；A田芳等，2000；Cirera 等，2000）。该方法的特点是：（1）是建立在生物信息学分析的基础上，进行同源性比较和计算机辅助克隆新基因，具有快速、简便、直接等优点；(2) 因为该方法在选择候选基因时有很强的目的性，是一种与定位克隆、定位候选克隆策略并列的比较候选基因法；（3）由于该方法是利用的是EST即cDNA部分序列信息，因而能够获得基因(cDNA) 全长（Liang等，2000）。

利用电子信息杂交策略在分离猪基因中的应用才刚起步（Cirera 等，2000），但该方法在人及其它动物基因分离中已经有广泛的应用（Mao等，1998；Bolognese, 等，2000；毕安定等，2000；范玉新等，1999），由此可见，利用电子信息杂交策略分离猪基因将具有良好的应用前景，在国内开展十分必要。

2. 猪12号染色体上基因及遗传与物理的研究现状与不足

12号染色体是猪基因组中最小的中部着丝粒染色体，1999年2月22曰申请者在网上检索到

的猪12号染色体上遗传与物理图谱现状如图1、图2、图3。收录到猪12号染色体上的基因和标记共57个，其中功能基因26个，微卫星标记31个。功能基因有：ALOX12（二十碳四稀酸-12-脂氧合酶，arachidonate 12-lipoxygenase ）；CDC42（GTP结合蛋白，porcine EST, GTP binding protein）；EAD（红细胞抗原D，erythrocyte antigen D）；GH1（生长激素，growth hormone）；HOXB6（同源框B6，Homeobox gene B6）；NME1（Nm23 protein）；INHBB（抑制素β亚基，Inhibin, beta subunit）；KICT（细胞骨架角蛋白类型I，Keratin type I, cytoskeletal）；MCP（单核苷酸趋化蛋白，Monocyte chemoattractant protein ）；PRKAR1A（cAMP依赖性蛋白激酶调节亚单位类型1A ，cAMP-dependent protein kinase regulatory type1 alpha）；POLR2 (大多肽RNA聚合酶Ⅱ,large polypeptide RNA polymerase II)；TK1(可溶性胸苷激酶1,thymidine kinase 1, soluble)；TP53 (肿瘤蛋白53, tumour protein p53)；UMPH2 (尿苷酸磷酸水解酶2, uridine 5'-monophosphate phosphohydrolase 2)； MAP2C（微管相关蛋白2，microtubule associated protein 2） ； ACACA（乙酰辅酶A羧化酶，acetyl-coA carboxylase）； MYH2 (肌球蛋白重链2，myosin heavy chain2)； GAS（胃泌素，gastrin）； PNMTP（苯基乙醇胺—N—甲基转移酶，phenylethanolamine N methyl transferase）； LPO（乳过氧化物酶，lactoperoxidase）； PAX8 ( 成对盒同源蛋白8， paired box homoprotein 8)； MYH1 (骨骼肌肌球蛋白重链，skeletal myosin heavy chain)； GRB2（生长因子受体结合蛋白2，growth factor receptor-bound protein 2）； D20238（human EST）； H01962（human EST）； Z94858（porcine EST b9）。微卫星标记有：S0083 ，S0090，S0096，S0106，S0143，S0147，S0229，SW1307，SW1350， SW1553，SW168， SW1936，SW1956，SW1962，SW2180，SW2490，SW2494，SW2559，SW37， SW467，SW60，SW605，SW62，SW874，SW943，SW957，SWC23， SWR1021，SWR1802，SWR390，X11004 。与1999年2月22曰检索结果比较，新增加了12个功能基因，而1998年3月至1999年2月22曰检索结果只增加了一个功能基因， 由此可见，猪12号染色体上基因和标记的定位进展正逐渐加快。另外随着快捷有效的定位工具如体细胞杂种克隆板(somatic cell hybrid panel)和体细胞辐射杂种板 (porcine radiation hybrid panel)的应用，将极大的提高猪基因定位的速度（Rothschild,2001）。

尽管于此，猪12号染色体上已知基因及微卫星DNA标记仍然偏少，仍需加强分离、鉴定猪12号染色体上新基因的研究力度。据研究结果，猪号染色体12的相对长度约占整个基因组的3%至3.2% （Liu等，1997年），哺乳动物基因组中一般大约有10万个左右的功能基因，由此可粗略推算猪12号染色体应有3000个左右的基因，由此可见猪12号染色体基因分离克隆工作仍需加强，猪12号染色体遗传与物理图谱还有待充实。 3. 猪12号染色体比较基因定位研究现状

哺乳动物比较基因组学研究揭示猪12号染色体与人整条17号染色体同源，与小鼠11号染色体之间存在大的染色体同源片段（Lalley 等，1989；Davission等，1991），并且猪与人之间基因组的保守程度比人与鼠相互之间的高（Johansson等，1995）。猪12号染色体占猪基因组的

3.5%，对应于人

17

号染色体，占人基因组的

2.7%

(http://www.toulouse.inra.fr/lgc/pig/compare/table.htm)。因此可以充分利用定位于人17 号染色体和小鼠11号染色体上的基因信息，可以加快分离和鉴定猪12号染色体上与猪重要经济性状有关的基因的速度（Rothschild,2001），这也是本申请项目的一个立论依据。据此，我们选取在猪基因组中尚未分离的且具明显生理功能的定位于人17 号染色体和小鼠11号染色体上，对应于猪12号染色体的20个基因作为本申请项目的候选基因。 4. 猪12号染色体基因的重要生理功能分析现状

目前，研究影响猪重要数量性状的基因或其DNA标记已成为国内外研究热点，并有一些研究进展。在猪12号染色体功能基因中，与猪经济性状有关的有GH基因（Nielsen 等，1995；Knorr等，1997； Yue等，2000）。近期研究也发现ADD1(adipocyte determination and differentiation factor-1)可能与肉质性状有关（Emnett等，2000）。此外，我们研究还初步显示PRKAR1A基因与二花脸和杜洛克猪的某些经济性状有关（删）。

从比较基因定位的分析结果看，猪12号染色体上的基因有重要的生理功能，应具有一大批与生长、发育、疾病相关的基因有待分离鉴定。因此，分离鉴定猪12号染色体上的新基因不仅必要，而且有希望筛选出与猪重要经济性状有关的基因标记。

5. 本项目的学术思想

根据比较基因组学的研究思路，充分利用GenBank EST数据库信息，采用具有明显优点的电子信息杂交筛选策略，快速分离和鉴定猪12号染色体上新的功能基因，并研究其结构特征、组织表达谱和遗传与物理定位以及基因效应，该研究将对于进一步阐述猪12号染色体的结构、功能、进化以及基因克隆、数量性状基因座（quantitative trait loci，QTL）定位均具有重要意义，对于提高我国在国际基因知识产权争夺战中的竞争力具有积极作用。

6. 本项目的意义

5.1 本项目拟分离和鉴定的候选基因具有重要的生理功能

我们借助人和小鼠基因组研究结果，利用比较候选基因方法，初步选定20个可能与猪的生长、发育、抗病等性状有关，参与调节生理生化反应的基因进行分离和鉴定。如ASPA、 CTNS、ICAM2、 P2X5、PMP22等与免疫和抗病性能有关（Town 等，1998；Kaul 等，1994；Donald 等，1989；Le等，1997；Edomi等，1993），ENO3与骨骼肌和心脏的发育调节有关（Agata等，1993），PSMD12、PSMC5与细胞凋亡、信号转导及应急性有关（Akihiko等，1997），ACRP和HSS与繁殖性能有关（Mao等1998；Shankar等，1998），GTPBIP、 GNGT2、 APOH则具有调节重要生理生化反应的能力（Schenker等，1994；Ong等，1997；Day等，1992）。

鉴于上述候选基因均具有重要的生理功能，研究其与猪某些数量性状的关联是很有必要的。

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