高产果胶酶菌株的筛选鉴定及其发酵条件研究_陈勇强(3)

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中国食品学报

2014年第2期

图1菌株G1在PDA平板上的菌落形态

图2菌株G1显微形态（×1000）

Fig.1ColonymorphologyofstrainG1onPDAplate

Fig.2Micro-morphologyofstrainG1（×1000）

2.2.218SrDNA序列分析菌株G1基因组DNA与18SrDNAPCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳，结果见图3、图4。基因组总DNA完整，没

有蛋白质等杂质，可满足PCR扩增试验需要。

18SrDNAPCR产物在1700bp左右有一特异性条带。PCR扩增产物回收后经生工生物工程（上

海）有限公司测序，测序结果拼接后有效长度为

1668bp。

2

M

M1

4500bp

2250bp1500bp1000bp750bp

注：M.250bpDNALadderMarker；1.基因组DNA；

图3G1菌株基因组DNA电泳图

2.18SrDNAPCR产物。

Fig.3ElectrophoresisofG1genomicgene

图4G1菌株18SrDNA电泳图

Fig.4ElectrophoresisofG118Sgene

利用NCBIGenBank数据库的Blast程序进行序列同源性比对，结果显示菌株G1的18SrD-2.3菌株G1液态发酵产酶培养基优化

2.3.1碳源及其添加量的优化分别以1.2%的

桔皮粉、果胶、乳糖和淀粉为碳源进行发酵，结果（图6）表明，以桔皮粉为碳源时，菌体的产酶效果最好，其次是果胶。由于桔皮粉与果胶具有充当碳源同时兼作诱导物的作用[15]，因此产酶能力较强。由于桔皮粉是成分复杂的天然物质，所以能提供生长因子、微量元素等成分，

以它为碳源时产酶能

NA序列与黑曲霉（Aspergillusniger）同源性达99%。以根霉属（Rhizopussp.）（gi323903582）作为外类群，将18SrRNA序列与下载的相关菌株序列构建系统发育进化树，结果见图5。同时结合菌

株G1的菌落和菌丝形态特征，确定菌株G1为黑曲霉。

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