高产果胶酶菌株的筛选鉴定及其发酵条件研究_陈勇强(5)

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中国食品学报

2014年第2期

2.3.2氮源及其添加量的优化以3.2%桔皮粉与1%麸皮作为复合碳源，在此基础上分别添加1.0%硫酸铵、硝酸铵、蛋白胨、豆饼粉作为氮源进

行液态发酵，确定最适氮源。结果（图9）表明，以硫酸铵为氮源时，菌体的产酶效果最好。一般来说，无机氮源比有机氮源更有利于霉菌产果胶酶，而且硫酸铵的效果最好[15，17-18]。确定硫酸铵为最适氮源，研究硫酸铵添加量对产酶的影响。黑曲霉适合于在酸性条件下生长代谢，硫酸铵是1种生理酸性物质[19]，硫酸铵的代谢利用有利于发酵pH维持在酸性范围，从而促进产酶；然而过多的硫酸铵会使菌体生长过速、培养基pH过低而导致菌体提早衰亡自溶，不利于产酶[15，19]。由图10可以看出，当硫酸铵添加量为2.2%时，酶活力最高，达到72.2U/mL。

5.5，6.0，6.5，7.0，7.5，研究不同pH对菌株G1产酶的影响，结果如图11所示。培养基初始pH偏酸时酶活力明显高于pH偏碱时的酶活力，pH高于6.5以后酶活力迅速下降。这表明黑曲霉适合于偏酸性环境中生长代谢。由于培养基初始pH为6.5，此时的酶活力较高，因此确定培养基的最适初始pH为6.5。

2.4

2.4.1

菌株G1液态发酵产酶条件优化

接种量对产酶的影响

将种子培养液以

3%~13%（体积分数）的接种量接入优化的培养基

中发酵，测定发酵液的果胶酶活力。由图12可知，随着接种量的增大，菌株的产酶活力提高，当接种量为9%时发酵液酶活力最高，为118.1U/mL。之后，随着接种量的增大酶活力开始下降，这可能是由于接种量过大时菌体生长过于旺盛，导致营养基质消耗过快而影响代谢产酶。

75酶活力/U·mL-1

2.3.3培养基初始pH对产酶的影响将碳源和

氮源优化的发酵培养基初始pH分别调整为5.0，

60

酶活力/U·mL-1

50403020100

硫酸铵

硝酸铵

蛋白胨

豆饼粉

6045301500.6

1.0

1.4

1.8

2.2

2.6

3.0

氮源种类

硫酸铵添加量/%

图9氮源对产酶的影响

图10硫酸铵添加量对产酶的影响

Fig.9Effectofnitrogensources

onpectinaseactivity

Fig.10Effectoftheamountof（NH4）2SO4

onpectinaseactivity

80酶活力/U·mL-1

140120酶活力/U·mL-1

706050403020

5.0

5.5

6.0pH

6.5

7.0

7.5

1008060402003

5

79

接种量/%

11

13

图11培养基初始pH对产酶的影响图12接种量对产酶的影响

Fig.11EffectofmediumpHonpectinaseactivityFig.12Effectofinoculationvolumeonpectinaseactivity

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