第14卷第2期高产果胶酶菌株的筛选鉴定及其发酵条件研究143
2.4.2溶氧对产酶的影响在250mL锥形瓶中察转速对产酶的影响，结果见图14。转速以180r/
分别装入30~100mL发酵培养基，研究装液量对产酶的影响，结果见图13。当装液量30~50mL时酶活力趋于稳定，当装液量大于50mL后酶活力急剧下降，表明转速对黑曲霉G1产果胶酶能力有显著的影响，这可能是菌株G1在生长代谢时对氧气需求量较大，而装液量大不利于溶氧，导致菌株生长受到抑制，产酶能力下降。
以50mL/250mL的装液量，将接种后的培养基分别置于120~240r/min转速的摇床中培养，考
min为最佳。
2.4.3培养温度对产酶的影响将菌株G1置于28~36℃条件下发酵，确定其最适发酵温度。图15
表明，菌株G1的最适发酵温度为32℃，此时酶活力达151.1U/mL。
2.4.4发酵周期将菌株G1置于优化的培养基
与培养条件下发酵，以确定最佳的发酵时间。图
16表明最佳发酵时间为7d，酶活力达到最高（270.4U/mL），之后酶活力逐渐降低。
8070酶活力/U·mL-1
酶活力/U·mL-1
80706050403020
120
140160
180200转速/r·min-1
220
240
605040302030
40
50
60
70
80
90100
装液量/mL
图13装液量对产酶的影响图14转速对产酶的影响
Fig.13Effectofmediumvolumeonpectinaseactivity
160酶活力/U·mL-1
Fig.14
350酶活力/U·mL-1
Effectofrotationspeedonpectinaseactivity
14012010080604028
30
32
温度/℃
34
36
2502001501005002
3
4
5
6
7
8
9
10
发酵时间/d
图15培养温度对产酶的影响图16黑曲霉G1菌株的发酵周期测定
Fig.15Effectofthecultivatetemperature
onpectinaseactivity
Fig.16Thefermentationperiodof
AspergillusnigerG1
3结论
以果胶为唯一碳源配制初筛培养基，用卢戈
菌株为黑曲霉（Aspergillusniger）。黑曲霉为公认的安全菌株，具有很好的开发应用前景。
对黑曲霉G1菌株进行培养基成分与发酵条件的优化研究，确定该菌株的最佳发酵培养基配方（g/L）：桔皮粉32，麸皮10，（NH4）2SO422，
氏碘液染色，观察透明圈，从腐烂的水果中分离得到8株HC比值大于1.50的产果胶酶菌株。通过发酵复筛后筛选出果胶酶活力较高的G1菌株。通过形态学观察和18SrDNA序列分析，鉴定G1
Na2HPO4·12H2O8.4，KH2PO41.4，MgSO4·7H2O
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