连翘木脂素类成分研究现状(2)

　　1.1.2 以木脂素类组分为考察指标涂秋云[11]以木脂素类组分为考察对象，建立了热浸提取法提取连翘木脂素类组分的工艺，确定了优化的工艺参数：75%乙醇，70℃，料液比1∶15， 每次1.5 h，提取3次。放大实验显示连翘木脂素类组分的平均得率为0.373%，平均提取率为88.9%，提取物中木脂素类组分的含量为1.86%，优化提取工艺条件适合放大生产。建立了“微波-半仿生”热浸提取法提取连翘木脂素类组分的工艺，确定了优化的条件参数为首次提取溶剂pH为5.5～6.0;第2次提取溶剂pH为7.0～8.0;微波强度为700 W;料液比1∶12;辐照时间l0min;提取次数2次。重复实验的平均得率为0.364%，平均提取率87.5%，提取物中木脂素类组分的含量为2.16%。

　　1.2 纯化工艺

　　1.2.1 以连翘苷为考察指标王金龙等[12]采用聚酰胺色谱柱对连翘提取物进行纯化，发现聚酰胺柱色谱法对进一步纯化连翘提取物效果明显，收率为60.2%。所得分离物中连翘苷含量达到50%以上，效果较好。于春波等[13]采用70%乙醇回流，D2820型大孔吸附树脂纯化等方法，以连翘苷含量为指标，测得干膏中连翘苷含量为27.2%，与纯化前(1.41%)相比，精制度提高了约19倍。赵文华[14]通过测定、分析、比较5种吸附树脂(AB-8,X-5,SP-825,NKA-9,NKA-12)对连翘苷的吸附量和洗脱量、洗脱率及洗脱物含量，发现AB-8树脂优于其他几种树脂。同时考察了AB-8树脂参数：洗脱剂、柱床径高比、上样液浓度、吸附流速、洗脱流速、洗脱体积等，确定最佳树脂富集工艺为：洗脱剂为50%乙醇，柱床径高比为1∶8，上样液浓度为0.1 g/ml，吸附流速为1 ml/min，洗脱流速为1 ml/min，洗脱液体积为柱床的10倍量(10 BV)。其制备方法简便，得率较高，可应用于生产。

　　1.2.2 以木脂素类组分为考察指标涂秋云[15]研究了溶剂萃取-大孔吸附树脂吸附-硅胶柱层析法分离纯化连翘木脂素类组分的优化工艺，通过正交实验确定了优化的溶剂萃取工艺为：提取溶剂为醋酸乙酯,料液比1∶4，每次20 min，提取4次。溶剂萃取后产品中连翘木脂素类组分的含量由1.86%提高到16.7%，平均萃取率达到95.6%。然后筛选出吸附效果最好的X-5型大孔吸附树脂，通过静态吸附和动态吸附确定了该树脂纯化工艺的条件(25℃，上柱溶液木脂素类组分含量约为1 000 mg/L，2 BV/h，8 BV的上柱溶液;解吸时先用水淋洗，再用80%乙醇解吸，脱附流速为1 BV/h，脱附剂的用量为3 BV/批)。产品中连翘木脂素类组分的含量由16.7%提高到82.5%，平均收率为90.4%。最后采用硅胶柱层析法制备高纯度的木脂素产品。确定了硅胶柱层析纯化工艺：上样树脂纯化浸膏(木脂素含量82.5%)与硅胶质量比1∶20，控制洗脱流速为1.5BV/h，用正己烷、石油醚、醋酸乙酯溶剂依次洗脱，收集石油醚：醋酸乙酯比例为7∶3、6∶4、5∶5的流出部分得到木脂素纯化产品，产品中木脂素含量为93.5%，收率为82.7%。纯化产品中木脂素含量达93.5%。

　　2 连翘木脂素活性研究

　　国内外报道的具有生物活性的连翘木脂素类成分包括连翘苷及其苷元、forsythialan A、forsythialan B、(+)-松脂素、(+)-松脂素-D-糖苷等成分。

　　2.1 抗氧化抗衰老作用

　　2.1.1 清除自由基和其他致衰老物质连翘木脂素类组分对HO·和H2O2具有很好的清除作用，且HO·的清除率与木脂素类组分呈浓度依赖性;能及时清除脂过氧化物自由基，抑制猪油的过氧化和酸败;对O2-·有一定的清除作用;对亚硝酸钠的作用较低[15]。连翘苷对DPPH自由基有一定的清除作用[16]。

　　2.1.2 保护神经细胞氧化损伤降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide，CGRP)和内皮素(endotheline，ET)是器官局部血流调节因子。CGRP为体内最强的扩血管物质，对神经元细胞缺氧损伤有保护作用[17]。ET是目前体内发现最强的内源性缩血管物质之一，具有强烈的收缩血管功能。缺血可以引起大鼠海马CA1区神经元ETs表达增高，此过程与自由基的大量生成密切相关 [18]。

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