最强的生物化学笔记(6)

解析：

（1）蛋白质、核酸

（2）蛋白质 因朊病毒对核酸酶类表现出强抗性，而对蛋白酶类不具抗性。

（3）①从理论上讲：“中心法则”认为DNA复制是“自我复制”，即DNA到DNA，而朊病毒蛋白是蛋白质到蛋白质，这对遗传学理论有一定的补充。 ②对探索生命起源与生命现象的本质有重要意义。

③为今后的药物开发和新的治疗方法的研究奠定了基础

4.分离蛋白质混合物的方法主要是根据蛋白质在溶液中的哪些性质？如果蛋白质溶液中 混有大量无机盐，如何简单地进行纯化？

答案1.分子大小、溶解度、电荷、吸附性质、对配体分子的生物学亲和力等。2.透析法：把待纯化的蛋白质溶液装在半透膜的透析袋里，放入透析液中进行透析，直到透析袋内无机盐等小分子物质降到最小值为止；或用超滤法 5.分子排阻层析的原理是什么？

答案分子排阻层析即凝胶过滤，原理为：当不同分子大小的蛋白质流经凝胶层析柱时，比凝胶珠孔径大的分子不能进入珠内网状结构，而被排阻在凝胶珠之外随着溶剂在凝胶珠之间的孔隙而向下移动并最先流出柱外；比网孔小的分子能不同程度地自由出入凝胶珠的内外。这样由于不同大小的分子所经的路径不同而得到分离，大分子物质先被洗脱出来，小分子物质后被洗脱出来

6.凝胶过滤层析和凝胶电泳中的分子筛效应有何不同？

答案：前者：大分子移动快，小分子移动慢；后者则相反：颗粒小的移动快，颗粒大的移动慢

7有一蛋白质，在某组织内含量较低，很难分离提纯。现已知其分子质量，并从其他实 验室要来该蛋白质的抗体，问用那些实验方法可以初步证实组织内的确含有该蛋白质？

答案：根据这种蛋白质的分子质量，选用一定浓度的聚丙烯酰胺制作分离胶，用SDS-PAGE分离从该组织提取到的蛋白质。然后，用蛋白质印迹技术，转移到特定类型的薄膜上，最后用酶联抗体进行检测，观察该分子质量的蛋白质条带是否呈阳性反应。如果呈阳性反应，则初步证实组织内的确含有该蛋白

8一个蛋白质的氨基酸序列显示，其内部不同序列位置存在两个甲硫氨酸残基，试问： （1）用什么试剂，可把此蛋白质裂解成片段？（2）如果裂解的片段分子量均在10000 以上， 且差距较大，可用何种方法分离？（3）用什么简单方法，可以测定这些片段的分子量？ （4） 如何证明它们都是从一个蛋白质分子裂解下来的片段？ （5）如何证明它们在该蛋白质内的 排列次序？

答案：1.可以用CNBr 作用于甲硫氨酸的羧基一侧，将肽链选择性地断裂为3 个肽段。 2.可以利用超滤或凝胶过滤，对得到的肽段进行分离。3.在使用凝胶过滤的同时分别测定每 个肽段的分子量。4.如果有现成的多克隆抗体，可以利用免疫方法鉴定它们的交叉反应。也 可用肽链的末端测定加以鉴定：其中有一段肽的N 末端应和样品相同；有一段肽的C 末端 应与原始样品相同，而其他两段肽的C 末端是高丝氨酸。5.一段N 末端和原始样品相同的 肽则是样品肽链的N 末端部分，这一肽段的C 末端应是高丝氨酸；一段C 末端和原始样品 相同的肽段为样品肽链的C 末端部分；而另一段C 末端是高丝氨酸的，而N 末端的序列与 原始样品不同的肽段则是样品肽链的中间部分。

9在有蛋白质抗体存在或不存在的条件下，请各写出一种方法证明某一种较低分子质量 的蛋白质是否为此蛋白质的降解产物？

答案：如果一个抗体同时对两个分子质量不同的蛋白质都有作用，则分子质量较低的蛋白质很可能是分子质量较高蛋白质的降解产物。证明抗原性相同的方法，可以用免疫双扩散，有时分子质量较小的肽链不能产生免疫沉淀反应，则可用免疫抑制实验。可是也有相当数量的蛋白质可以具有相同或相似的免疫原性，能产生免疫交叉反应，但是其结构上仍有差异。为此，要证明一个组分是否是另一个蛋白质的降解产物，更有效的方法就是比较两者的酶解图谱。例如，早年用的双向图谱，以及近年来常用的HPLC。最为有效的方法是酶解产物的质谱比较。然而，这些方法均较免疫反应复杂，而且耗时。

好题精选：

1、天然蛋白质中不存在的氨基酸是：C

A、半胱氨酸 B、脯氨酸 C、瓜氨酸 D、丝氨酸

2、下图表示脂双层中的膜蛋白。关于此蛋白质中氨基酸分布的下列说法中哪一条是正确的。A

A、埋在脂双层中的那部分蛋白质分子中疏水氨基酸占优势，而亲水氨基酸则分布在此分子的其他部分

B、带电荷的氨基酸的分布是随机的

C、埋在膜中的那部分蛋白质分子中亲水氨基酸占优势

D、在此蛋白质分子的N端以亲水氨基酸为主，而在此分子的其他部分氨基酸的分布是无规则的。

E、在蛋白质中氨基酸的分布与它和脂双层的相互作用之间没有什么关系

3、在pH5.12时进行电泳，哪种蛋白质既不向正极移动，也不向负极移动？C A、血红蛋白（pI=7.07） B、胸腺组蛋白（pI=10.8） C、β-球蛋白（pI=5.12） D、血清清蛋白（pI=4.64） 4、下列说法中哪一条解释了青霉素为什么起抗生素的作用？B A、青霉素抑制核酸的合成

B、青霉素抑制胞壁质的合成，胞壁质是建造细菌细胞壁所必需的物质 C、在原核生物中青霉素抑制蛋白质合成 D、真核生物迅速分解青霉素 5、会发生变性的物质有哪些？D

A、只有蛋白质 B、只有核酸 C、只有脂类 D、有核酸和蛋白质 6、朊病毒是什么？A

A、一种蛋白质 B、没有蛋白质外膜的感染性RNA C、引物RNA的DNA模板 D、没有线粒体的早期真核生物 E、脂肪酸生物合成的多酶体系 7、对于变性过程的描述，下列各项说法哪项是正确的？B A、它使二级结构和三级结构丢失，一级结构也遭破坏。

B、它使二级结构和三级结构丢三失，而一级结构不被破坏。

C、只使四级结构丢失 D、使聚合物的化学反应性减小。 8、考虑两者的关系和有关氨基酸-蛋白质和脂肪酸-甘油三酯的4种叙述 左 氨基酸 右 蛋白质 左 脂肪酸 右 甘油三酯 （1）表中右侧的两种分了含有左侧分子的重复单位

（2）在右侧两种分子合成过程中，至少一些电荷是中性的 （3）在两种关系中，左侧分子的变化决定右侧分子的变化 （4）在右侧两种分子的合成中释放水 哪些叙述是正确的？B

A、（1）（2）（3）（4） B、（2）（3）（4） C、（3）（4） D、只有（3） E、只有（4）

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