医学分子生物学复习思考题及答案(8)

合物的形成，增强翻译过程。如生长因子能增加eIF-4E磷酸化，于是翻译加快，促进细胞生长

22、举例说明RNA结合蛋白对翻译过程的调节？

答：RNA结合蛋白（RBP，RNA birding protein）能与 RNA 特异序列结合，从而参与调节翻译过程。如铁反应元件结合蛋白（IRE-BP）（IRE: Iron response element,铁反应元件）与mRNA结合后，能促进ALA合成酶的合成等。

23、miRNA对基因表达有何影响？miRNA的特点有哪些？

答：miRNA（micro-RNA，微小RNA）属于小分子非编码 RNA，长度约20个碱基，它与一些蛋白质共同组成 RNA诱导沉默复合体 RISC（RNA-induced silencing complex）,它能与mRNA结合，从而抑制 mRNA的翻译功能。

miRNA的特点：

(1) 长度为20-25个碱基。

(2) 在不同生物中普遍存在，昆虫、家鼠、人类乃至植物中均含有。

(3) 同一种类生物体内，其序列结构具有一定的保守性，但动植物之间其序列结构不存在一致性。

(4) miRNA 的表达具有明显时间特异性及空间特异性。

(5) miRNA基因以单拷贝、多拷贝或基因簇形式存在于非编码区，它具有高度多样性。

24、siRNA 对基因表达有何影响？什么是RNAi？

答：siRNA：干扰小RNA是由细胞内的一类双链RNA（dsRNA, double-stranded RNA），在特定条件下，由相应酶的酶切作用，产生了特殊序列的小片段dsRNA，长度约21-23碱基，称之为siRNA。这种双链 siRNA参与组成RISC，并能与特异的靶 mRNA互扑结合，导致mRNA降解，阻断翻译过程。这种由 siRNA介导的抑制基因表达的作用，称之为RNA干扰（RNAi，RNA inlerference）， 它被广泛用于基因功能研究及基因治疗。

第二十章 常用分子生物学技术的原理及应用

1、什么是核酸分子杂交？

答：核酸分子杂交：根据核酸单链片段之间碱基互补而相结合的原理，用一已知碱基顺序的DNA或RNA单链片段作为探针来检测未知待测DNA或RNA中的核苷酸顺序。若对探针进行标记，根据有无标记信号而确定有无杂交体存在。又根据探针的碱基顺序，按碱基配对规则就可以测定待测DNA或RNA的碱基顺序。

2、什么是核酸探针？核酸探针的来源有哪些？探针的标记方法有哪些？

答：（1）核酸探针:核酸探针是一已知碱基顺序的DNA或 RNA单链片段，它能与待测 DNA或RNA 按碱基配对规则进行杂交反应。为了便于观察是否发生杂交反应以及杂交反应的位置及强弱，必须对探针进行标记，从而确定待测核酸（基因）是否存在，进而确定待测核酸的碱基顺序。

(2) 核酸探针的来源

① 人工合成：用核酸合成仪按预定目标合成一已知碱基顺序的寡核苷酸片段，常用的是DNA片段。

② 从基因组获得：用 PCR法扩增基因组中的某个基因片段。

③ cDNA探针：从真核细胞液中提取mRNA，经逆转录得到CDNA, 用cDNA全长或其部分片段作为探针。

④ RNA探针：由于RNA不太稳定，常较少用。

(3) 探针标记

百度搜索“70edu”或“70教育网”即可找到本站免费阅读全部范文。收藏本站方便下次阅读，70教育网，提供经典教育范文医学分子生物学复习思考题及答案(8)在线全文阅读。